[发明专利]无糖型赖氨葡锌颗粒及其质量检测方法

权利要求书

1.测定无糖型赖氨葡锌颗粒剂中盐酸赖氨酸含量的方法，其中所述无糖型赖氨葡锌颗粒剂包括：盐酸赖氨酸、葡萄糖酸锌、枸橼酸和甘露醇，该方法是使用柱前衍生化高效液相色谱法进行测定的。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于以下任一项或多项：

其是先使供试品进行柱前衍生化反应，再对该反应产物进行高效液相色谱法测定；

其中进行柱前衍生化的衍生化试剂是2,4-二硝基氟苯；

其中进行柱前衍生化反应是在弱碱存在下进行的；

所述弱碱选自碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾；

在进行柱前衍生化反应时，盐酸赖氨酸与所述弱碱的重量比为1：20～200，例如重量比为1：30～150，例如重量比为1：40～120，例如重量比为1：50～100；

其中在进行柱前衍生化反应时，盐酸赖氨酸与所述2,4-二硝基氟苯的重量比为1：5～15，例如重量比为1：7.5～12.5，例如重量比为1：10；

其中所述柱前衍生化的反应是照如下方式进行的：取含盐酸赖氨酸25mg的供试品(即本发明的无糖型赖氨葡锌颗粒剂)，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml置50ml量瓶中，加浓度为4-6％的弱碱溶液(盐酸赖氨酸与所述弱碱的重量比为1：20～200，例如重量比为1：30～150，例如重量比为1：40～120，例如重量比为1：50～100)与浓度为0.8～1.2％的2,4-二硝基氟苯乙腈溶液(盐酸赖氨酸与所述2,4-二硝基氟苯的重量比为1：5～15，例如重量比为1：7.5～12.5，例如重量比为1：10)，摇匀，置60℃水浴中暗处加热，间隔10min振摇1次，经过30min后取出，冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，作为测试溶液；和/或

所述柱前衍生化的反应是照如下方式进行的：取含盐酸赖氨酸25mg的供试品(即本发明的无糖型赖氨葡锌颗粒剂)，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml置50ml量瓶中，加5％碳酸氢钠溶液1.0ml与1％的2,4-二硝基氟苯乙腈溶液1.0ml，摇匀，置60℃水浴中暗处加热，间隔10min振摇1次，经过30min后取出，冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，作为测试溶液。

3.根据权利要求1的方法，其特征在于以下任一项或多项：

所述高效液相色谱法使用的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；

所述高效液相色谱法使用的流动相为乙腈与磷酸二氢钾缓冲液以体积比40～60：50(例如50：50)的混合液；

所述磷酸二氢钾缓冲液是照如下方法配制的：称取磷酸二氢钾2.72g，用水1000ml溶解，加25％的四甲基氢氧化铵4-6ml(例如4.5-5.5ml，例如5ml)，摇匀，用磷酸调节pH3.2，即得；

所述高效液相色谱法使用的柱温为35～45℃，例如38-42℃，例如40℃；

所述高效液相色谱法使用的检测波长为350-370nm，例如360nm；和/或

其包括以下步骤：

照中国药典2010年版二部附录ⅤD高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸二氢钾缓冲液(称取磷酸二氢钾2.72g，用水1000ml溶解，加25％的四甲基氢氧化铵5ml，摇匀，用磷酸调节pH3.2)(50:50)；柱温40℃；检测波长360nm；理论塔板数按盐酸赖氨酸峰计算不低于5000；赖氨酸与相邻杂质峰的分离度符合要求；

测定法：取供试品适量(约相当于盐酸赖氨酸25mg)，精密称定，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1ml置50ml量瓶中，加5％碳酸氢钠溶液1.0ml与1％的2,4-二硝基氟苯乙腈溶液1.0ml，摇匀，置60℃水浴中暗处加热，间隔10min振摇1次，经过30min后取出，冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸赖氨酸对照品适量，同法处理并测定；按外标法以峰面积计算供试品中盐酸赖氨酸的含量，即得。