[发明专利]一种地木耳抗肿瘤多糖及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及蓝绿藻类植物多糖的制备和应用，具体属于一种地木耳抗肿瘤多糖及其制 备方法，以及在制备抗肿瘤药物和天然保健食品中的应用。

背景技术

地木耳，学名普通念珠藻(Nostoc commune Vauch.)，俗称地皮菜，别名地衣、地菜菇、 地软儿、地菜皮、地耳，为藻类蓝藻纲念珠藻科(nostocaceae)念珠藻属植物念珠藻(nostoc  commune vauch)的片状藻类。一般生长在潮湿的砂质土壤表面,常混杂于杂草基部的茎叶间、 大树的基部及苔醉植物群间。地木耳几乎在全国均有分布，在东北地区尤其是长白山区有广 泛的野生资源分布，在山西亦有很高的产量。

《本草纲目》记述地木耳:“气味:甘、平、无毒；主治:明目益气,补肾。”《名医别录》 中记述“主明目,益气,令人有子。”《食物考》中认为:“清神解热,痰火能疗”“久服延年,盖 亦能清脏热者。目前已有文献报道：它含有丰富的蛋白质、糖类、多种微量元素及一定的粗 脂肪和粗纤维，具有较高的食用和营养价值，是典型绿色山野天然食品；同时经常食用具有 清热解毒、凉血明目、促进新陈代谢的功效，是很好的医疗保健食品。因此，地木耳可以作 为一种食药两用的保健食品。

多糖类物质是指一类由10个以上单糖分子聚合而成的天然高分子化合物，是维持正常生 命活动的大分子物质之一。有研究表明，地木耳多糖物质具有抗氧化和抑菌活性，还有抗疲 劳、抗病毒、降血糖、降血脂、消炎等功能，但尚未看到地木耳多糖抗肿瘤活性的研究。本 实验以地木耳为材料，提取出一种具有抗肿瘤活性的多糖，该多糖能够显著抑制人乳腺癌细 胞的增殖。因此，本发明不仅能够应用于抗肿瘤药物、天然新食品和健康饮品的研制开发， 同时为促进地木耳资源的深度开发和有效利用提供理论依据。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的地木耳多糖及其制备方法，以及其在 制备抗肿瘤药物和保健食品中的应用。

本发明提供的一种地木耳抗肿瘤多糖的方法，包括如下步骤：

第一步：取地木耳，60℃干燥2小时后粉碎，加蒸馏水加热回流3小时，静置，双 层纱布过滤，取上清液，如上重复提取1次，合并滤液，减压蒸发浓缩至粘稠状；

第二步：浓缩后的提取液边搅拌边加入10.6％的亚铁氰化钾(K₄[Fe(CN)₆]·3H₂O)，摇匀， 再加入21.9％的乙酸锌(C₄H₈O₄Zn)，振摇均匀，以沉淀蛋白，室温下放置30分钟，5000rpm 离心20分钟后取上清液，减压蒸发浓缩至粘稠状；所述的亚铁氰化钾、乙酸锌和提取液 体积比为1︰1︰8-15；

第三步：用截留量为3000的透析袋，将第二步得到的浓缩液在蒸馏水中透析，每12小 时换水一次，直至透析液电导率不变，以除去离子和单糖等小分子杂质；

第四步：在第三步得到的提取液中加入无水乙醇，涡旋，室温放置0.5-1小时，以沉淀多 糖，然后5000rpm离心15-20分钟，收集沉淀；所述的提取液和无水乙醇体积比为3-2︰7-8；

第五步：在上述沉淀中加入适量蒸馏水,50-60℃下搅拌溶解，直至成均一液体，再真空 冷冻干燥成絮状物即得粗多糖样品，命名为NVPS，于4℃保存。

第二步中所述的10.6％亚铁氰化钾溶液、21.9％乙酸锌溶液和提取液体积比优选为1 ︰1︰10。

第四步中所述的提取液和无水乙醇体积比优选为3︰7。

第五步中所述的溶解沉淀加热温度优选为55℃。

上述制备方法制得的地木耳多糖可在制备新型抗癌药物中应用，也可在制备保健品中 应用。

经体外抗肿瘤活性检测显示，上述制备方法制得的地木耳多糖可明显抑制癌细胞增殖， 具有良好的抗癌活性。结果显示用不同浓度该多糖处理人乳腺癌细胞(MCF-7)24小时、浓度 为300ug/ml时,致死率达到约25％；处理36小时、浓度为200ug/ml时,致死率高至约60％， 所以该多糖对癌细胞(MCF-7)具有良好的抑制效果。