[发明专利]一种复合微生态制剂及其制备方法有效
申请号: | 201410461391.7 | 申请日: | 2014-09-11 |
公开(公告)号: | CN105462872B | 公开(公告)日: | 2019-08-13 |
发明(设计)人: | 胡婷;马青山;贠锦军;何增国 | 申请(专利权)人: | 北京大北农科技集团股份有限公司;福建大北农水产科技有限公司;天津昌农科技有限责任公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N1/18;C02F3/34;C12R1/125;C12R1/11;C12R1/10;C12R1/07;C12R1/25;C12R1/24;C12R1/865;C12R1/01 |
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地址: | 100086 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 复合 生态 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种复合微生态制剂,其特征在于,其为枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、屎肠球菌、短小乳杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳球菌和酿酒酵母通过混菌液体深层发酵制备而成,其中,所述的枯草芽孢杆菌的保藏号为CGMCC No.9356,所述的屎肠球菌的保藏号为CGMCC No. 9134。
2.如权利要求1所述的复合微生态制剂,其特征在于,芽孢杆菌的活菌数为1×109-10CFU/mL,乳酸菌活菌数为1×109-10CFU/mL,酵母菌的活菌数为1×106-8CFU/mL。
3.权利要求1或2所述的复合微生态制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
1)种子液制备:分别制备所述菌株的一级和二级种子液;
2)种子罐发酵:将步骤1)的制备的所述菌株的种子液混合均匀后接入种子罐进行混合发酵,发酵温度33℃,转速60-100rpm,灌压0.5Mpa,通风比是1:0.4-0.8,pH值为4.3-7.0,发酵时间8-10h;
3)发酵罐发酵:种子罐发酵完成后,全部接入发酵罐进行发酵罐发酵,发酵温度33℃,转速60-100rpm,灌压0.5Mpa,通风比是1:0.4-0.8,pH值为4.3-7.0,发酵时间8-10h。
4.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,芽孢杆菌种子液的制备方法如下:
将所述的芽孢杆菌的单菌落分别接种至MNB培养基中,180rpm,33℃培养12-16h至OD600为0.9~1.1;按照1.0-2.0%的接种量将制备的一级种子液接种至MNB培养基中,180rpm,33℃培养10-12h至OD600为0.7~1.0。
5.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,乳酸菌种子液的制备方法如下:
将所述的乳酸菌的单菌落分别接种至MRS培养基中,37℃培养16-24h至OD600为0.8~1;将制备好的一级种子液按照1.0-2.0%的接种量接种至MRS培养基中,37℃培养16-20h至OD600为0.7-1.0。
6.如权利要求3所述的制备方法,其特征在于,酿酒酵母种子液的制备方法如下:
将酿酒酵母接种至YPD培养基中,180rpm 30℃培养12-16h至OD600为0.8-1.0;将制备好的一级种子液按照0.5-1.0%的接种量接种至YPD培养基中,180rpm 30℃培养10-12h至OD600为0.8-1.0。
7.如权利要求4-6任一项所述的制备方法,其特征在于,种子罐发酵和发酵罐发酵所用培养基含有:可溶性淀粉5-10g/L;蛋白胨15-20g/L;酵母膏2-4g/L;葡萄糖15-20g/L;磷酸二氢钾2-4g/L;氯化钠3-5g/L;碳酸钙0.5-1g/L。
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