[发明专利]一种大叶藻体细胞胚的诱导方法有效
| 申请号： | 201410462339.3 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN105393912B | 公开（公告）日： | 2017-07-14 |
| 发明（设计）人： | 郑凤英;刘雪芹;金艳梅;张伟;韩晓弟;李乐乐 | 申请（专利权）人： | 山东大学（威海） |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 264209 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 大叶藻 体细胞 诱导 方法 | ||
1.一种大叶藻体细胞胚的诱导方法，其特征在于包括下列步骤：
1)外植体的选取：以大叶藻花枝为外植体供体，取其健康幼嫩佛焰苞花序，经表面除杂、清洗后在超净工作台内进行消毒处理，剥去佛焰苞花序外的苞叶，得到无菌的花序；
2)体细胞胚的诱导培养：将无菌花序切成3-5mm长的外植体片段，接种于培养基中，在15-25℃、黑暗或弱光条件下进行培养；15-25d后花序上组织萌动，产生小突起，逐渐发育为体细胞胚，期间不经历愈伤组织阶段；体细胞胚诱导培养基为以MS、N6培养基为基础培养基，添加了琼脂、海盐、水解酪蛋白、蔗糖或葡萄糖和植物激素，其中，琼脂添加量为5-7g/L，海盐添加量为20-35g/L，水解酪蛋白添加量为100-1000mg/L，蔗糖或葡萄糖的添加量为30-120g/L，植物激素的种类和用量为2,4-D 5mg/L、或NAA 2mg/L、或IAA10mg/L、或噻苯隆0.2mg/L、或2,4-D 5mg/L+6-BA 0.5mg/L，培养基pH＝6-8。
2.根据权利要求1所述大叶藻体细胞胚的诱导方法，其特征在于所述的培养基优选以MS培养基为基础培养基，并添加水解酪蛋白500mg/L、蔗糖60g/L、2,4-D 5mg/L、琼脂5g/L、海盐20g/L，培养基pH＝7。
3.根据权利要求1所述大叶藻体细胞胚的诱导方法，其特征在于所述的培养条件优选16℃下暗培养。
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