[发明专利]一种大叶紫株组织培养的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及大叶紫珠组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。

背景技术

大叶紫珠，又名羊耳朵、止血草、赶风紫、贼子叶，马鞭草科，Callicarpa macrophylla，灌木，稀为小乔木，高3-5m，小枝近方形，密生灰白色粗糠状分枝茸毛。单叶对生；叶柄粗壮，产广东、广西、贵州、云南。生于海拔100-2000米的疏林下和灌丛中。尼泊尔、锡金、不丹、马斯克林群岛、留尼汪岛、印度、孟加拉、缅甸、泰国、越南、马来西亚和印度尼西亚也有分布。以水分充足、土地肥沃、阳光充足的地方，生长为好。种植主要用扦插繁殖。叶含谷甾醇，木犀草素，芹菜素，木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸甙，芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸甙，β-谷甾醇-β-D-葡萄糖甙，熊果酸，2α-羟基熊果酸，山楂酸，二十二烷酸，二十三烷酸，二十四烷酸，二十三烷酸乙酯及3，7，3′-三甲氧基5，4′-二羟基黄酮。根、地上部位及叶中均含有两种四环双萜：大叶紫珠萜酮和大叶紫珠萜酮单乙酸酯，叶或根可作内外伤止血药，治跌打肿痛、创伤出血、肠道出血，咳血、鼻衄，种植技术主要采用自然繁殖，利用组培技术可以缩短其培养周期，且操作简单可控。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种大叶紫株的快速繁殖方法，由该方法所制备的大叶紫株分化成活率高，生长周期短，为大叶紫株资源的开发利用提供基础。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

取大叶紫株的叶片，用0.1%的氯化汞浸泡15min，无菌水冲洗4次，在1%的柠檬酸溶液中进行切割成0.5cm×0.5cm的小块，消毒处理过的大叶紫株的叶片，接入MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.15mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.9，暗光照，温度23℃，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.1-0.2mg/L+NAA0.03-0.05mg/L+2,4-D1.5-2.0mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂进行愈伤组织的分化培养，pH5.9，光照3000lx，温度25℃，光期14h/d，分化后的芽苗接入改良1/2MS（大量、微量元素含量减半）培养基中进行生根诱导，pH5.9，光照12000lx，温度25℃，光期14h/d，试管苗长约4cm时取出，洗去基部培养基，栽植于高温消毒过的森林腐殖土：珍珠岩=2：1铺设的基质中，一周后喷施35%乙烯利，每周喷一次，共喷3次，覆盖60%的遮荫网，定时浇水除草，每隔两周喷施6000倍的乐果，温度控制在25℃，湿度90%，三个月后观察生长情况。

采用本发明制备的大叶紫株生根率高，周期短，产量大，利于大规模种植。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取大叶紫株的叶片，用0.1%的氯化汞浸泡15min，无菌水冲洗4次，在1%的柠檬酸溶液中进行切割成0.5cm×0.5cm的小块，消毒处理过的大叶紫株的叶片，接入MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.15mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂的培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.9，暗光照，温度23℃，诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.03mg/L+2,4-D1.5mg/L+30g/L蔗糖+7g/L琼脂进行愈伤组织的分化培养，pH5.9，光照3000lx，温度25℃，光期14h/d，分化后的芽苗接入改良1/2MS（大量、微量元素含量减半）培养基中进行生根诱导，pH5.9，光照12000lx，温度25℃，光期14h/d，试管苗长约4cm时取出，洗去基部培养基，栽植于高温消毒过的森林腐殖土：珍珠岩=2：1铺设的基质中，一周后喷施35%乙烯利，每周喷一次，共喷3次，覆盖60%的遮荫网，定时浇水除草，每隔两周喷施6000倍的乐果，温度控制在25℃，湿度90%，三个月后观察生长情况，成活率88%。

实施例2