[发明专利]一种川桂植株再生的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及川桂组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。

背景技术

川桂，Cinnamomum wilsonii Gamble，乔木，樟科，产陕西、四川、湖北、湖南、广西、广东及江西。生于山谷或山坡阳处或沟边，疏林或密林中，海拔（30-300) 800-2400米。枝叶和果均含芳香油，油供作食品或皂用香精的调合原料。川桂树皮入药，功效补肾和散寒祛风，治风湿筋骨痛、跌打及腹痛吐泻等症。川桂皮在西方古代被用作香料。中餐里用它给炖肉调味，是五香粉的成份之一。目前关于川桂的种植栽培尚未见报道，组培技术是川桂快速繁殖的有效方法之一，可以有效提高川桂的资源开发和充分利用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种川桂的快速繁殖方法，由该方法所制备得到的川桂再生分化率高，生产周期短，可以在短期内获得大量的川桂幼苗。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min，超净工作台上1000ppm的硝酸银浸泡3s，次氯酸钠消毒处理10min，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入GD+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照500lx，温度25±1℃，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基GD+NAA5.0-6.0mg/L+KT1.5-2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照2000lx，温度25±1℃，诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0-6.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照8000lx，温度25±2℃，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土：沙子=1：1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎。

采用本发明制备的川桂成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min，超净工作台上1000ppm的硝酸银浸泡3s，次氯酸钠消毒处理10min，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入GD+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照500lx，温度25±1℃，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基GD+NAA5.0mg/L+KT1.5mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照2000lx，温度25±1℃，诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照8000lx，温度25±2℃，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土：沙子=1：1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎，成活率87%。

实施例2

取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min，超净工作台上1000ppm的硝酸银浸泡3s，次氯酸钠消毒处理10min，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入GD+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照500lx，温度25±1℃，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基GD+NAA6.0mg/L+KT2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照2000lx，温度25±1℃，诱导出的根接入培养基MS+6-BA6.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照8000lx，温度25±2℃，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土：沙子=1：1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎，成活率89%。

实施例3

取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min，超净工作台上1000ppm的硝酸银浸泡3s，次氯酸钠消毒处理10min，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入GD+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照500lx，温度25±1℃，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基GD+NAA6.0mg/L+KT2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照2000lx，温度25±1℃，诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照8000lx，温度25±2℃，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土：沙子=1：1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎，成活率90%。