[发明专利]一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法

权利要求书

1. 一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，包括一枝黄花茎尖的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：

（1）取一枝黄花幼嫩的茎尖，对其进行消毒处理；

（2）取步骤（1）消毒处理过的一枝黄花幼嫩茎尖接入MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.1mg/L培养基中进行愈伤组织的诱导，附加蔗糖40g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，暗室培养，温度23±2℃，湿度65%；

（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基MS+6-BA0.2-0.3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖50g/L，琼脂6.5g/L，pH5.83，光照3500lx，温度25±2℃；

（4）取步骤（3）分化出来的丛生芽接入1/3MS培养基中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5g/L，pH5.7，光照16000lx，温度25±2℃；

（5）取步骤（4）生根的试管苗进行炼苗移栽。

2. 按照权利要求1所述的一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述一枝黄花无菌茎尖的获得为，取一枝黄花幼嫩的茎尖，流水冲洗30min，超净工作台上75%的酒精处理30s，0.1%的升汞处理11min，无菌水冲洗5次，放在吸水纸上吸干，解剖针剥去外层苞片，用解剖刀切取顶端2cm。

3. 按照权利要求1所述的一种一枝黄花脱毒培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中一枝黄花的炼苗培养方法为已生根的瓶苗从培养室内取出，掀开封口膜，放置室温，加入少量水以保证苗木不失水，炼苗4天后取出，洗去根部培养基，用百菌清1000倍液浸泡3min，移栽到装有黄心土的基质中，基质使用高压装置灭菌30min，温度控制在25℃，进行间歇补水，40天后统计成活率。