[发明专利]一种短瓣花环肽A的固相合成方法和应用

权利要求书

1.一种短瓣花环肽A的固相合成方法，所述短瓣花环肽A的结构为环-(Pro¹-Pro²-Ala³-Gly⁴-Leu⁵-Ala⁶-Thr⁷-Phe⁸)，其特征在于，包括如下步骤：

1)合成直链八肽：

(1-1)提供Fmoc-AA₁-树脂，采用去保护剂脱除Fmoc保护基，得到氨基酸树脂，其中，Fmoc为芴基甲氧羰基，AA₁为直链八肽C端的第一个氨基酸，所述直链八肽C端的第一个氨基酸为丙氨酸、甘氨酸或亮氨酸；

(1-2)在活化剂的存在下，将Fmoc-AA_n-OH单体氨基酸分别进行酰氯化处理，得到Fmoc-AA_n-Cl单体氨基酸酰氯，其中，AA_n为直链八肽C端的第n个氨基酸，n为2～8的自然数，所述活化试剂为三光气；

(1-3)碱性条件下，按照n取值分别为2到8的顺序，分别将各Fmoc-AA_n-Cl单体氨基酸酰氯和树脂上的氨基酸依次进行缩合，每缩合一次后，先采用去保护剂处理缩合所得氨基酸树脂，脱除Fmoc保护基后再进入下一次缩合反应，待全部缩合完成后，得到直链八肽树脂，其中，第一次缩合采用步骤(1-1)的氨基酸树脂；

(1-4)在切割剂的存在下，使直链八肽树脂上的多肽和树脂分离，得到所述直链八肽；

2)采用缩合试剂将所得直链八肽进行环化后得到所述短瓣花环肽A，其中所述直链八肽的C端的第一个氨基酸作为所述环化中的羧基端。

2.如权利要求1所述的短瓣花环肽A的固相合成方法，其特征在于，所述步骤(1-1)中，所述Fmoc-AA₁-树脂取代值为0.1～1.0mmol/g。

3.如权利要求1所述的短瓣花环肽A的固相合成方法，其特征在于，所述采用活化剂制备各种Fmoc-AA_n-Cl单体氨基酸酰氯的步骤包括：

将Fmoc-AA_n-OH单体氨基酸和活化剂溶于惰性溶剂中，0～30℃下加入第一有机碱反应1～30分钟，得到Fmoc-AA_n-Cl单体氨基酸酰氯；

其中，以三光气换算成光气后的摩尔数计算，所述活化剂中总光气的摩尔数为所述Fmoc-AAn-OH单体氨基酸的摩尔数的0.99～2.01倍。

4.如权利要求3所述的短瓣花环肽A的固相合成方法，其特征在于，所述惰性溶剂为四氢呋喃(THF)、二噁烷、二甘醇二甲醚和1,3-二氯丙烷中的至少一种。

5.如权利要求3所述的短瓣花环肽A的固相合成方法，其特征在于，所述第一有机碱为三甲基吡啶、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶或2-甲基喹啉。

6.如权利要求1所述的短瓣花环肽A的固相合成方法，其特征在于，所述步骤(1-3)中，每次缩合反应中，各Fmoc-AA_n-OH单体氨基酸酰氯和树脂上的氨基酸进行缩合的步骤包括：

将待缩合的Fmoc-AA_n-OH单体氨基酸酰氯、第二有机碱和氨基酸树脂溶于第二有机溶剂中，惰性气体鼓泡条件下反应0.5～2小时，完成一次缩合反应；

其中，所述Fmoc-AA_n-OH单体氨基酸酰氯的摩尔数为氨基酸树脂取代值总摩尔数的2～8倍；所述第二有机碱为N,N-二异丙基乙胺、N-甲基吗啉和三乙胺中的至少一种。

7.如权利要求6所述的短瓣花环肽A的固相合成方法，其特征在于，所述第二有机溶剂为DMF和NMP中的至少一种。