[发明专利]一种吲唑磺菌胺及其代谢物IT-4残留量的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于痕量分析技术领域，具体涉及一种吲唑磺菌胺及其代谢物IT-4残留量的检测方法。 

背景技术

吲唑磺菌胺是日本日产化学公司创制的三唑磺酰胺类杀菌剂，结构新颖独特，其最早于2003年报道。该药剂主要对卵菌和变形菌类有效。其持效性强，耐雨水冲淋，对多种病害有稳定的效果，是一种前景较好的杀菌剂。作为一种新型药剂，吲唑磺菌胺在农业生产中使用还存在较大的盲目性。由于国内外对吲唑磺菌胺的相关研究较少，所以需对吲唑磺菌胺的检测方法及残留行为等方面开展深入和广泛的研究，为规范用药，保障农业生产和人民健康给予技术上的支持。 

吲唑磺菌胺主要代谢为IT-4。研究表明，IT-4毒性远高于其母体。在分析吲唑磺菌胺的同时，需要特别关注其代谢物的产生和含量变化。目前对吲唑磺菌胺及其有毒代谢物IT-4的残留分析国内外尚未见相关报道，在国内外还处于空白阶段。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作较简单、对目标物干扰少，准确 检测吲唑磺菌胺及其代谢物IT-4残留的检测方法。该方法具有简便迅速、准确可靠的特点，对指导吲唑磺菌胺的安全合理使用，控制食品和作物中吲唑磺菌胺残留具有重要价值。 

本发明是通过以下技术方案实现的： 

一种吲唑磺菌胺及其代谢物IT-4残留量的检测方法，包括以下步骤： 

(1)标准溶液的配制：称取吲唑磺菌胺及其代谢物IT-4标准品，用有机溶剂溶解定容，制成标准储备液，将标准储备液逐级稀释，配制成系列浓度标准工作液； 

(2)提取：称取样品于离心管中，加入乙腈，涡旋振荡，加入盐包、涡旋振荡、离心，取上清液； 

(3)净化：量取步骤(2)中提取液于离心管中，然后加入吸附剂，涡旋、离心，取上清液； 

(4)仪器检测：待仪器状态稳定后，用步骤(1)中的系列浓度标准工作液进样，超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MSMS)检测，在此基础上，对步骤(3)收集的净化样品进行UHPLC-MS/MS检测； 

(5)标准曲线的建立：采用峰面积定量，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线； 

(6)结果分析：按以下公式计算试样中农药的含量 

R—样品中所含农药残留量，单位mg/kg； 

C_标—标准溶液浓度，单位mg/L； 

V_标—标准溶液进样体积，单位μL； 

S_样—样品溶液中被测农药的峰面积； 

V_终—样品溶液最终定容体积，单位mL； 

V_样—样品溶液进样体积，单位μL； 

S_标—标准溶液中被测农药的峰面积； 

W—样品称样重量，单位g； 

进一步地，所述步骤(1)中称取标准品的重量为0.01g±0.2mg；有机溶剂采用色谱甲醇。 

进一步地，所述步骤(1)中标准储备液是指制成100mg/L储备液。 

进一步地，所述步骤(2)中乙腈使用量为2mL/g试样； 

进一步地，所述步骤(2)中盐包是指无水硫酸镁，氯化钠，柠檬酸钠和柠檬酸氢二钠的混合物。使用量无水硫酸镁0.4g/mL提取液、氯化钠0.1g/mL提取液、柠檬酸钠0.1g/mL提取液、柠檬酸氢二钠0.05g/mL提取液。 

进一步地，所述步骤(3)中的吸附剂为无水硫酸镁与N-丙基乙二胺(PSA)、C18、石墨化炭黑(GCB)中的一种或者两种组合。无水硫酸镁使用量为0.15g/mL提取液；PSA、C18和GCB使用量均为0.05g/mL提取液。 

进一步地，所述步骤(4)中UPLC-MS/MS选用Thermo Scientific TSQ Quantum Ultra；色谱柱选用Thermo Hypersil GOLD C18色谱柱(2.1×100mm,3.0μm)； 

色谱检测条件： 

柱温：25℃； 

流动相：A相为甲醇，B相为0.1％甲酸水溶液； 

梯度洗脱条件为:0～0.5min，保持20％A；0.5～1.5min，20％～90％A；1.5～6.0min，保持90％A；6.0～7.5min，90％～20％A；7.5～10.0min，保持20％A； 

流速：0.25mL/min； 

进样量：10μL； 

质谱条件： 

离子源：电喷雾离子源ESI；