[发明专利]一种胆汁液态培养基及其应用

说明书

技术领域

本发明为微生物领域，特别涉及一种胆汁液态培养基及其应用。

背景技术

微生物培养(microculture)是生物培养的中的一种。所培养的微生物主要有病毒、细菌、放线菌、真菌等。微生物培养需要用到培养基，根据微生物的不同种类和生活习性来配制特定的培养基。微生物培养成功的关键在于无菌操作，如果培养器具和培养基不能彻底灭菌、培养的过程中有杂菌污染是很容易失败的。

肠球菌(Enterococcus)属肠球菌属，是人类和动物肠道正常菌群的一部分，通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现，既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌，但近年研究已证实了肠球菌的致病力。在需氧革兰阳性球菌中，它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌，肠球菌亦可引起院外感染。肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等。

溶血性链球菌，需氧或兼性厌氧菌，营养要求较高，普通培养基上生长不良，需补充血清、血液、腹水，大多数菌株需核黄素、维生素B6、烟酸等生长因子。最适生长温度为37℃，在20-42℃能生长，最适pH为7.4-7.6。在血清肉汤中易成长链，管底呈絮状或颗粒状沉淀生长。在血平板上形成灰白色、半透明、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落，不同菌株溶血不一。

粪肠球菌，根据最新分类原则，粪链球菌又叫粪肠球菌。应用C多糖抗原，根据兰氏(Lancefield)血清学分类，可将链球菌分成许多群。粪链球菌属于D群。D群链球菌分肠球菌和非肠球菌两类。前者包括粪链球菌(S.faecalis)、屎链球菌(S.faecium)和坚忍链球菌(S.durans),后者有牛链球菌(S.bovis)和马肠链球菌(S.equinus)。

其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃pH9.6或含6.5％NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。DNA-DNA杂交结果显示，肠球菌与链球菌属同源程度低，故有学者建议另立肠球菌属，与人类有关者为粪肠球菌(E.faecalis)和屎肠球菌(E.faecium)。

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基)，较长时间的贮存，必须放在3～6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。

发明内容

本发明克服现有技术中的不足，提供一种胆汁液态培养基及其应用。

本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。

本发明所采用的技术方案为：

一种胆汁液态培养基，所述培养基的组分包括33g/L脑心浸液肉汤、22.0g/L猪胆粉、0.88g/L柠檬酸铁，pH值为7.3-7.5；所述的脑心浸液肉汤为每升肉汤中含有蛋白胨12.0g、脱水小牛脑浸粉12.5g、氯化钠5.0g、葡萄糖5.0g、磷酸氢二钠2.5g。

本发明还公开了胆汁液态培养基的应用用于粪链球菌的胆汁耐受试验。

蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。

称取本品45g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷至45±1℃，倾入含1ml样品液平皿中约15ml培养基，混匀，凝固。

本发明的有益效果：

1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；

2、菌生长迅速，变异率低；

3、便于观察，分析。

具体实施方式

实施例1：