[发明专利]一种含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂，其特征在于，所述益生菌剂是由粪肠球菌(Enterococc us faecalis)活性菌泥、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)活性菌泥、酿酒酵母菌(Saccharomyce s cerevisiae Hansen)活性菌泥和稳定化保护剂制备而成；

所述粪肠球菌保藏编号为CGMCC NO.9353；

所述稳定化保护剂的制备方法如下：以重量份数计，准确称取玉米淀粉40-60份，微晶纤维素5-25份，羧甲基纤维素钠1-8份，葡聚糖3-5份，甘油2-4份，乳糖1-3份，取原料总重量20-35％的水，首先将微晶纤维素、羧甲基纤维素钠和葡聚糖均匀混合得混合物，将混合物加入水中室温浸泡3-5h，边升温边搅拌，80-90℃保温20-30min，搅拌，充分溶解，继续保温，边搅拌边依次加入乳糖、甘油和玉米淀粉，充分搅拌，混合5-10min即得稳定化保护剂。

2.如权利要求1或2所述的含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂，其特征在于，所述粪肠球菌活性菌泥、枯草芽孢杆菌活性菌泥、酿酒酵母菌活性菌泥和稳定化保护剂混合的质量比为0.1-0.8∶1-2.5∶0.1-0.5∶1。

3.如权利要求1或2所述的含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂，其特征在于，所述粪肠球菌活性菌泥的制备方法如下：将经活化的粪肠球菌斜面菌种挑取1-2环接种于液体种子培养基35℃、180r/min培养3-5h，得到种子液；取3mL种子液接种于300mL摇瓶种子培养基中35℃、180r/min培养6h，得到摇瓶种子液；取0.30L摇瓶种子液接种于装有30L发酵种子培养基的50L发酵罐中，35℃、110r/min发酵3-5h，得到发酵罐种子液；取30L发酵罐种子液接种于装有3000L发酵培养基的5000L发酵罐中，5-38℃，80-100r/min，培养6-12h得到发酵液，发酵液经10000-16000r/min离心20-40min即得粪肠球菌活性菌泥。

4.如权利要求3所述的含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂，其特征在于，所述发酵培养基质量组分组成为：红糖1.5％，大豆蛋白胨0.5％，酵母提取物0.4％，硫酸镁0.2％，硫酸锰0.045％，氯化钠0.2％，柠檬酸二铵0.5％，碳酸钙0.1％，消泡剂0.005％，余量为水，pH5.5-6.8。

5.如权利要求1所述的含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌活性菌泥的制备方法如下：取经活化的枯草芽孢杆菌斜面菌种1-2环接种于300mL一级种子培养基中，进行摇瓶发酵培养，发酵温度为20-45℃、转速200r/min，发酵时间10-20h，得到一级种子液。将一级种子液转接到50L发酵罐二级种子培养基中，接种量为1-2％，装液量为30L、发酵温度为20-45℃、拌转速150r/min，培养5-10h得到二级种子液，将二级种子液转接到发酵培养基中，接种量2-6％，接种后，温度控制在20-45℃，搅拌转速120-180r/m，培养30-48h得到枯草芽孢杆菌发酵液，发酵液经10000-16000r/min离心20-40min即得枯草芽孢杆菌活性菌泥。

6.如权利要求1或2所述的含粪肠球菌的鸡饲料益生菌剂，其特征在于，所述酿酒酵母菌活性菌泥的制备方法如下：取经活化的酿酒酵母菌斜面菌种1-2环接种于300mL一级种子培养基中，进行摇瓶发酵培养，发酵温度为20-35℃、转速120r/min，发酵时间8-15h，得到一级种子液。将一级种子液转接到50L发酵罐二级种子培养基中，接种量为1-2％，装液量为30L、发酵温度为20-35℃、搅拌转速120r/min，培养5-10h得到二级种子液，将二级种子液转接到发酵培养基中，接种量5-10％，接种后，温度控制在20-35℃，搅拌转速100-150r/m，培养30-72h得到酿酒酵母菌发酵液，发酵液经10000-16000r/min离心20-40min即得酿酒酵母菌活性菌泥。