[发明专利]检测澳大利亚葡萄类病毒的RT-qPCR寡核苷酸及检测方法

权利要求书

1.一组检测澳大利亚葡萄类病毒的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸如序列表SEQ ID No.1至序列表SEQ ID No.3所示；其中序列SEQ ID No.1和SEQ ID No.2分别为检测澳大利亚葡萄类病毒的正义引物和反义引物，序列SEQ ID No.3为检测澳大利亚葡萄类病毒的荧光探针。

2.根据权利要求1所述的检测澳大利亚葡萄类病毒的寡核苷酸，其特征在于，所述荧光探针序列SEQ ID NO：3的5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团BHQ1。

3.权利要求1或2所述的检测澳大利亚葡萄类病毒的寡核苷酸在制备检测澳大利亚葡萄类病毒试剂盒中的应用。

4.一种澳大利亚葡萄类病毒的RT-qPCR检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括以下组分：

(1)RT-qPCR反应液，其包括：序列表SEQ ID No.1所示的正义引物，序列表SEQ ID No.2所示的反义引物，序列表SEQ ID No.3所示的荧光探针，所述荧光探针的5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团BHQ1；

(2)阴性对照；

(3)RNA标准品：序列表SEQ ID No.4所示的基因片段体外转录获得的非感染性RNA片段。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述RT-qPCR反应液还包括：含Mg²⁺的PCR缓冲液，dNTP混合物，反转录酶，RNA酶抑制剂，Taq DNA聚合酶和DEPC水。

6.一种澳大利亚葡萄类病毒的RT-qPCR检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)提取样品RNA；

(2)对提取的样品RNA进行RT-qPCR扩增；其中，使用序列表SEQ ID No.1所示的正义引物，序列表SEQ ID No.2所示的反义引物，序列表SEQ ID No.3所示的荧光探针，所述荧光探针的5’端标记报告荧光基团FAM，3’端标记淬灭荧光基团BHQ1；

(3)根据RT-qPCR反应体系的荧光强度进行结果判定。