[发明专利]一种铁皮石斛的薄层鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种铁皮石斛的薄层鉴别方法，属于中药材质量控制技术领域。

背景技术

铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是一种珍稀名贵的中药材，其滋阴效果被历代医家所推崇，被尊为“中华九大仙草”之首，具有滋阴清热、益胃生精的功效，在我国已经有2000多年的药用历史。《中华人民共和国药典》(2010年版一部)规定铁皮石斛为兰科植物铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo的干燥茎。由于野生资源极度有限，栽培铁皮石斛投入成本高，铁皮石斛及其加工品铁皮枫斗价格昂贵，因此市场上出现了多种其他石斛属药材混为铁皮石斛使用。目前最常见的有紫皮石斛(Dendrobium devonianum Paxt.)等。这给铁皮石斛市场带来了极大的用药安全隐患。

铁皮石斛的伪品与正品的性状十分相似，性状鉴别真伪难度大，需要丰富的实践经验积累。2010年版《中华人民共和国药典》(一部)铁皮石斛项下记载了以铁皮石斛对照药材为参照的薄层鉴别项，其具体内容是:取本品粉末1g，加甲醇50m1，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用石油醚(60～90℃)洗涤2次，每次20ml，弃去石油醚液，水液用乙酸乙酯洗涤2次，每次20ml，弃去洗液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取铁皮石斛对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，使成条状，以乙醇-丁酮-乙酰丙酮-水(15：15：5：85)为展开剂，展开，取出，烘干，喷以三氯化铝试液，在105℃烘约3分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点【图1】(注：A:对照药材1-3：铁皮石斛)。但是，该薄层鉴别方法缺乏专属性的指标性成分，且样品制备方法较为复杂，在应用时具有一定的局限性。

石斛属植物种类丰富，化学成分结构类型多样，主要含有联苄类、菲类、黄酮类、生物碱类、多糖类等。

发明内容

针对以上的问题，本发明旨在提供一种专属性强且操作简便的铁皮石斛及其药材的薄层鉴别方法。

本发明所述的铁皮石斛及其药材的薄层鉴别方法是以夏佛塔苷(schaftoside)、佛来 心苷(violanthin)、异佛来心苷(isoviolanthin)、铁皮石斛对照药材为对照，采用薄层色谱法进行定性鉴别和分析。

本发明所述的铁皮石斛及其药材的薄层鉴别方法由以下步骤组成：以夏佛塔苷、佛来心苷、异佛来心苷、铁皮石斛对照药材为对照，采用薄层色谱法进行定性鉴别，包括以下步骤：

a、供试品溶液和对照药材溶液的制备：取本品粉末1g，加甲醇45～55ml，超声处理25～35分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15～20ml使溶解，用乙酸乙酯洗涤2次，每次25～35ml，弃去洗液，用水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次20～25ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

b、对照品溶液制备：取夏佛塔苷(Schaftoside)、佛来心苷(Violanthin)、异佛来心苷(Isoviolanthin)对照品，分别加甲醇制成每1ml含有0.1mg的溶液，作为对照品溶液。

c、薄层色谱法鉴别：取上述供试品溶液3-7μl、对照药材溶液3-7μl，对照品溶液1μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板(HSGF₂₅₄)上，使成条状，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(5～4：4～3：0.8～1.2：0.8～1.2)为展开剂，展开，取出，烘干，喷以三氯化铝试液，在105℃烘2～3分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

其中步骤a与b没有先后顺序。

铁皮石斛及其药材薄层色谱鉴别研究

供试品溶液的制备：考察了提取溶剂，如甲醇、90％甲醇、80％甲醇、95％乙醇和无水乙醇，表明甲醇提取较好。考察了提取方法，如超声处理(15分钟、30分钟、45分钟)、回流(1小时、2小时、3小时)，发现超声处理30分钟处理较好。