[发明专利]以石仙桃根状茎为外植体快速繁殖石仙桃的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种繁殖石仙桃的方法，特别涉及一种以石仙桃根状茎为外植体快速繁殖石仙桃的方法，属于植物组织培养技术领域。

背景技术

石仙桃(Pholidota chinensis Lindl.)系兰科(Orchidaceae)石仙桃属(Pholidota)多年附生草本植物，俗称石橄榄。植株高15-25㎝，根状茎粗壮，横走，具多，数须根；假鳞茎卵状长圆形或长圆形，长2-7㎝，粗0.5-2.5㎝，顶端具2片叶。叶倒卵状披针形、倒卵形或倒卵状椭圆形，长8-18㎝，宽2-5㎝，顶端急尖或渐尖，基本下延成长柄，通常有较明显的弧形脉3-5条。花葶长于假鳞茎顶端，直立或多少下垂，基部具多枚鳞片；总装花序顶生，具数朵至20朵花；花苞片2列，淡褐色或淡紫红色，卵形或卵状披针形，长1-2㎝，顶端钝或尖，边缘多少内卷；花白色或带黄绿色，唇瓣上有褐色条纹；萼片卵形，分离，近等大，长约8㎜，宽4-5㎜，顶端钝；花瓣线状披针形，与萼片近等长，宽约1.5㎜；唇瓣卵状圆形，长约8㎜，基部凹陷成杯状或囊状，顶端3裂，中裂片扁圆形，长约3㎜，宽约4㎜，顶端钝，具小尖头，外弯，侧裂片半圆形；蕊柱长4-5㎜，有狭翅；子房连花梗长6-9㎜。果倒卵形，长2-3㎝，具6条纵翅。花期4-6月。果期11月至翌年2月(林来官,张永田等.福建植物志[M].福州:福建科学技术出版社,1994,第六卷:636-637)。在我国分布于福建、广东、广西、云南等省，在福建省主要分布于福州、平和、长乐、南靖等地区。生于林中或林缘树上、岩壁上或岩石上，海拔通常在1500m以下，少数可达2500m(陈心启,吉占和,郎楷永等.中国植物志[M].北京:科学出版社,1999,18:388-399)。

石仙桃作为中草药具有悠久的历史，始载于《生草药性备要》。以全草或假鳞茎入药，其性甘味凉，具有养阴、清热、利湿消瘀的功效(南京中医药大学.中药大辞典[M].上海:上海科学出版社,2006)，民间常用来治疗高血压、头晕和各种原因引起的头疼等。用其制成的“头痛定糖浆”临床上用于治疗神经功能性头痛、脑震荡后遗症，已应用多年，治疗效果良好(中华人民共和国药典委员会.中药成方制剂(第九册).北京:北京化学工业出版社,1994:67)。

近几年对其药理进行了比较多的研究，报道其在镇静、催眠、抗癌、抗疲劳等方面都有作用(刘建新,周青,连其深.石仙桃对中枢神经系统抑制作用.赣南医学院学报,2004,24(2):119-121；王光辉,郭晓宇,王乃利等.云南石仙桃氯仿萃取物活性部位对入肝癌细胞HepG2的周期抑制作用.沈阳药科大学学报,2006,23(4):240-243；刘建新,周青,连其深.石仙桃的镇痛作用的研究.赣南医学院学报,2002,22(2):105-107)。同时现在对其化学成分做了不同方法的提取和分离，得到天麻苷元、原儿茶醛、胡萝卜苷等化学成分(舒文海.石仙桃的局麻作用研究.中国药学杂志,1989,24(5):304；林丽聪,张怡评,吴春敏等.石仙桃叶化学成分研究.时珍国医国药,2009,20(4):922-923；李兵,郭环娟,容羡贤.石仙桃质量标准研究.中国药业,2010,19(6):19-20；林丽聪,吴春敏,陈海滨等.RP—HPLC法测定石仙桃中天麻素和天麻苷元.中草药.2008,39(2):283-285)。

随着临床对石仙桃研究的深入和新功能的开发，人们的需求量与日俱增，但由于其生长缓慢、生物量小、自然繁殖率低、对生长环境要求苛刻，自然资源贮藏量及可开发利用量非常有限，长期掠夺式采挖野生资源，已导致野生资源锐减并逐渐匮乏，不少原产地石仙桃资源呈现稀缺趋势，因此人工栽培迫在眉睫。而充足的种苗供给是实现石仙桃人工栽培的第一个瓶颈，并且现有技术中关于石仙桃繁殖的方法效率极低，为此本发明对石仙桃的繁殖方法进行了研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以石仙桃根状茎为外植体快速繁殖石仙桃的方法，以解决现有技术中存在的上述问题，本发明所提供的方法能有效提高石仙桃的繁殖效率，获得足量石仙桃再生植株，为其规模化生产应用奠定基础。

本发明的技术方案如下：

一种以石仙桃根茎芽为外植体快速繁殖石仙桃的方法，所述的方法包括以下依序进行的步骤：

(1)外植体的准备阶段

于每年11月至次年的4月采集石仙桃，除去假鳞茎，将根茎上带有根状茎的顶芽或腋芽作为外植体切下，去除根状茎上覆盖的老鳞片和根，备用；

(2)无菌处理阶段，包括以下依序进行的步骤：