[发明专利]用于声学流式细胞计量术的方法

权利要求书

1.一种使用流式细胞计数器检测罕见事件的方法，所述流式细胞计数器包括：

包括样本通道的毛细管；

耦合至所述毛细管的至少一个振动产生换能器，所述至少一个振动产生换能器被配置成产生声信号，所述声信号引起所述样本通道内的声辐射压力以声学集中在所述样本通道中的流体样本流内流动的颗粒；

包括紫光激光器和蓝光激光器的探询源，所述紫光激光器和所述蓝光激光器被配置成与经声学集中的颗粒中的至少一些相互作用以产生输出信号；

光学模块，用于收集来自所述探询源的输出信号；

检测器模块，用于检测所述光学模块的输出信号；以及

数据采集模块，用于处理所述检测器模块的输出，

其中所述光学模块包括收集来自所述探询源的输出信号的收集透镜，并且其中所述收集透镜的输出用空间滤光针孔装置分成两个光束，其中第一光束是来自所述紫光激光器的输出而第二光束是来自所述蓝光激光器的输出，

所述方法包括：

使包括颗粒的样本流体流入通道；

通过将声辐射压力施加到包含在所述通道内的第一区域而将样本流体中的颗粒的至少一些声学聚焦在所述第一区域中；

通过使鞘液围绕所述样本流体流动而将包括所述至少一些经声学聚焦的颗粒的样本流体流体动力学地聚焦在第一区域下游的第二区域中；

调节所述鞘液与所述样本流体的容积比以保持处于第二区域内或下游的探询区中的大致恒定的总颗粒速度；

分析所述探询区中的经声学和流体动力学聚焦的颗粒的至少一些；以及

基于在所述探询区检测到的至少一个信号检测一个或多个罕见事件，所述一个或多个罕见事件选自下列：一个或多个罕见荧光事件、一个或多个罕见细胞类型、以及一个或多个死亡细胞。

2.根据权利要求1所述的方法，包括使样本流体以至少200微升每分钟的样本流速流动并且使鞘液以至多2200微升每分钟的鞘液流速流动，并且其中调节所述鞘液与所述样本流体的容积比包括将所述鞘液与所述样本流体的容积比调节到大约11比1至大约1.4比1之间的比率。

3.根据权利要求1所述的方法，包括使样本流体以至少500微升每分钟的样本流速流动并且使鞘液以至多1900微升每分钟的鞘液流速流动，并且其中调节所述鞘液与所述样本流体的容积比包括将所述鞘液与所述样本流体的容积比调节到大约3.8比1至大约1.4比1之间的比率。

4.根据权利要求1所述的方法，包括保证所述经声学和流体动力学聚焦的颗粒通过所述探询区的通过时间超过大约20微秒。

5.根据权利要求1所述的方法，包括保证所述经声学和流体动力学聚焦的颗粒通过所述探询区的通过时间超过大约40微秒。