[发明专利]一种鉴定凤梨花粉活力的方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物花粉活力的鉴定技术领域，具体涉及一种鉴定凤梨花粉活力的方法。

背景技术

花粉的采集、贮藏以及对它活力的鉴定是植物杂交育种的重要环节，花粉活力的高低大大影响了自交和杂交的成功率。目前鉴定花粉活力的方法已有多种，主要有显微镜形态观测法、氯化三苯基四氮唑染色法(TTC染色法)和碘-碘化钾染色法(I-KI染色法)、离体萌发法等。其中离体萌发法是测定花粉活力最简单、可靠的方法。因为花粉萌发率是衡量花粉生活力状况的重要指标，同时花粉管的长度在一定程度上也反映了该花粉的生活力状况。目前用的离体萌发法均采用固体培养基，需要进行溶液配制、分装、灭菌、凝固等步骤，过程较麻烦、耗时长，而且必须提前准备。

发明内容

本发明目的是，针对现有花粉离体萌发法存在有固体培养基需提前配制、分装、灭菌、凝固等步骤，过程麻烦、耗时长等缺陷，提出一种简单、快速、准确鉴定凤梨花粉活力的方法。

本发明目的通过以下技术方案得以实现：

一种鉴定凤梨花粉活力的方法，该方法按如下步骤进行：

(1)配制培养液：每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和5-10mg硼酸，混合均匀并调ph至6.4-6.6后，备用；

(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片，再将培养液倒入培养皿中至刚淹没载玻片的顶面；

(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存0-24h的凤梨花粉后，盖上玻璃培养皿的盖子，在20-30℃室温中静置2-4小时；

(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察5-7个视野中花粉的萌发情况，统计获得花粉的平均萌发率，筛选出花粉萌发率在50％-90％以上的批样花粉。

本发明的有益效果是：

1、本发明对凤梨花粉活力的鉴定改常规的固体培养基为液体培养法，该培养液的配制简单，不需要经过灭菌、冷却、凝固等耗时、复杂的步骤，可随配随用；所用的培养皿、载玻片等都是实验室的常用物品，比较方便；

2、在培养皿中平卧放置一载玻片，既利于显微镜观察，又可使花粉不致于沉入培养液底部而影响萌发；

3、本发明通过观察花粉的萌发情况即可统计、鉴定出凤梨花粉的活力，具有可靠、直观、快捷的特点。

附图说明

图1凤梨花粉活力鉴定的装置示意图

其中，1-花粉、2-载玻片、3-玻璃培养皿、4-培养液

图2凤梨花粉活力鉴定装置的侧面示意图

其中，1-花粉、2-载玻片、3-玻璃培养皿、4-培养液

具体实施方式

通过以下实施例并结合附图对本发明作进一步的详细描述，但本发明的内容并不局限于此。

对实施例所涉试剂和仪器的说明：

显微镜为莱卡公司生产的Leica M205C

实施例1：

一种鉴定凤梨花粉活力的方法，该方法按如下步骤进行：

(1)配制培养液：每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和7.5mg硼酸，混合均匀并调ph至6.4后，备用；

(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片，再将培养液倒入培养皿中至刚淹没载玻片的顶面；

(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存5h的凤梨花粉后，盖上玻璃培养皿的盖子，在25℃室温中静置3小时；

(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察5个视野中花粉的萌发情况，统计获得花粉的平均萌发率，筛选出花粉平均萌发率在90％以上的批样花粉。

实施例2：

(1)配制培养液：每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和5mg硼酸，混合均匀并调ph至6.5后，备用；

(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片，再将培养液倒入培养皿中至刚淹没载玻片的顶面；

(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存14h的凤梨花粉后，盖上玻璃培养皿的盖子，在20℃室温中静置4小时；

(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察6个视野中花粉的萌发情况，统计获得花粉的平均萌发率，筛选出花粉萌发率在75％以上的批样花粉。

实施例3：

(1)配制培养液：每100ml蒸馏水中加入20g蔗糖和10mg硼酸，混合均匀并调ph至6.6后，备用；

(2)在玻璃培养皿中先平卧放置普通载玻片1片，再将培养液倒入培养皿中至刚淹没载玻片的顶面；

(3)在载玻片上均匀、松散撒上采后保存24h的凤梨花粉后，盖上玻璃培养皿的盖子，在30℃室温中静置2小时；

(4)将载玻片放置于20倍显微镜下观察7个视野中花粉的萌发情况，统计获得花粉的平均萌发率，筛选出花粉萌发率在50％以上的批样花粉。