[发明专利]栀子提取物在制备抗含NDM-1耐药基因大肠杆菌药物中的应用

说明书

本发明是中国发明专利申请(发明名称：清开灵活性组分栀子提取物在制备抗多重耐药菌的药物中的应用；申请日：2012年12月17日；申请号：201210550177.X)的分案申请。

技术领域

本发明涉及栀子的一种新的医药用途，具体地说是在栀子提取物制备抗多重耐药菌药物中的应用。

背景技术

多重耐药菌(multiple resistant bacteria)是指有多重耐药性的病原菌，即一种微生物对三类(比如氨基糖苷类、红霉素、B－内酰胺类)或三类以上抗生素同时耐药。其中最为多见的是NDM-1、MDR-TB、MDR-MRSA以及常在ICU中出现的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌。NDM-1(New Delhi metallo-β-lactamase-1，新德里金属β-内酰胺酶)，又名NDM-1细菌，是一种耐碳青霉烯类的酶。NDM-1基因常由质粒携带，但也整合在细菌的染色体上，易于在不同的菌株间传播和扩散，NDM-1编码的蛋白单体分子量为28kDa，它的序列和其他MBL的序列相似性很低。NDM-1主要分布在肠杆菌科和鲍曼不动杆菌中，携带NDM-1的细菌不但包括条件致病菌，也包括致病菌，如常见的志贺氏菌、霍乱、绿脓假单胞杆菌等。它具有高度耐药性，几乎可以水解临床常用的一线抗菌药物，包括β-内酰胺类、碳青霉烯类、氟喹诺酮类、氨基糖苷等。长期以来，抗生素药物的滥用，是催生多重耐药菌的重要原因。目前，多重耐药菌感染呈现出增长趋势，但抗菌药物选择方案却很少，因此重耐药菌感染已成为全球性棘手问题。

栀子(茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实)为清热解毒复方中药清开灵注射液的主要原料药，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用，在中医临床常用于治疗黄疸型肝炎、扭挫伤、高血压、糖尿病等症，并且具有良好的效果。开发和研究栀子更多更好的医药功效，是许多中医药学领域的重要研究课题之一。

发明内容

本发明的目的就是要开发栀子提取物的新医药用途，同时为临床提供一种可有效拮抗多重耐药菌的药物。

本发明的发明人经长期研究发现栀子提取物对含NDM-1耐药基因细菌具有显著地抑制作用，且与药物浓度成正比，从而发明了栀子提取物的一种新的医药用途，即完成了栀子提取物在制备抗多重耐药菌药物中的应用。

本发明所述的栀子提取物可按照常规的中药提取方法进行。

本发明在此提供的方法如下：

(1)取栀子适量，加水煎煮两次，过滤，合并两次滤液；

(2)所得滤液减压浓缩，放冷后在搅拌下加乙醇使含醇量达60％，冷藏，过滤，滤液回收乙醇，加水稀释，过滤；

(3)将所得滤液上大孔吸附树脂，依次用水、乙醇洗脱，收集洗脱液，过滤，减压回收乙醇至无醇味，得栀子提取物，冷藏。

其中，步骤(1)中，加水煎煮，第一次加8倍量的水，煮沸2小时，第二次加6倍量的水，煮沸1小时；步骤(2)中，加水稀释至相对密度1.05～1.2(60℃)；步骤(3)中，洗脱剂水用量是5～7倍量柱体积、乙醇是8～10倍量柱体积的40％乙醇。

本发明所述栀子提取物，可按照现有技术所述方法制备成颗粒、冲剂、射剂、胶囊等药物制剂。

本发明中所述的多重耐药菌是指含有NMD-1基因的多重耐药菌，包括乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii，A.baumannii)、嗜麦芽寡养窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)或含NDM-1耐药基因大肠杆菌(Escherichia coli)。

上述含NDM-1耐药基因检测菌株为革兰氏阴性菌，具有较强的致病性和抗生素耐药性。其中，乙酸钙不动杆菌和鲍曼不动杆菌可引起肺部感染、伤口及皮肤感染、泌尿生殖系统感染、菌血症菌血症、脑膜炎等，麦芽寡养窄食单胞菌能引起严重的呼吸系统感染等，含NDM-1耐药基因大肠杆菌可引发对肠道感染且对抗生素具有抗药性。

更进一步地，本发明还提供了栀子提取物在制备抗乙酸钙不动杆菌药物中的应用，即栀子提取物在制备治疗和/或预防乙酸钙不动杆菌引起的疾病的药物中的应用。

更进一步地，本发明还提供了栀子提取物在制备抗鲍曼不动杆菌药物中的应用，即栀子提取物在制备治疗和/或预防鲍曼不动杆菌引起的疾病的药物中的应用。