[发明专利]一种肉苁蓉鳞茎提取物的制备方法及抗氧化作用

说明书

本发明公开了一种包含寡糖混合物的肉苁蓉鳞茎提取物的制备方法，该方法包括：a)沸水提取；b)浓缩，然后脱蛋白，然后碱中和；c)透析，浓缩，离心去沉淀，上清液用有机溶剂沉淀；d)收集沉淀，干燥后得到干燥的肉苁蓉鳞茎水提多糖；e)步骤d)所得肉苁蓉鳞茎水提多糖在强酸、70‑200℃温度条件下降解；f)去除酸性成分，离心后取上清液得到包含寡糖混合物的肉苁蓉鳞茎提取物。本发明还涉及本发明方法制备得到的肉苁蓉鳞茎提取物及其纯化富集寡糖后的产物在具有抗氧化作用的化妆品中的应用。

技术领域

本发明涉及天然药物化学领域和化妆品领域，更具体地说，涉及一种从中草药肉苁蓉的鳞茎提取得到的主要成分之一多糖经降解后获得的寡糖混合物。此外，本发明还涉及所述方法提取得到的肉苁蓉鳞茎提取物的抗氧化作用。具体涉及该肉苁蓉鳞茎提取物在制备具有抗氧化作用的化妆品中的应用。

背景技术

日常生活中，各种各样的环境压力都会对皮肤造成损伤，例如紫外线、 PM2.5等。研究表明，氧化损伤是环境压力对皮肤造成伤害主要途径之一。

活性氧自由基(ROS)为正常细胞代谢产物，也可作为细胞信号传导分子。随着人体的衰老，人体自身抗氧化系统下降以及外界因素的干扰，如UV照射，导致体内ROS水平的升高。过量ROS对细胞造成损伤，如引起DNA损伤，蛋白氧化，非酶糖基化，基质金属蛋白酶表达的升高，炎症等等。这些都称为ROS所造成的氧化损伤。自由基学说是由英国分子生物学家Harman于1956年提出的，它的中心内容包括：自由基是机体氧化反应中产生的有害物质，具有极强的氧化性；在正常生理条件下，机体内自由基的产生与消除处于动态平衡；一旦这种平衡被破坏则会导致过量自由基的产生；过量的自由基对染色体、线粒体、细胞膜和结缔组织等生物组织的毒害性攻击会引起机体的氧化损伤。自由基引起机体氧化损伤的机制可以概括为以下三个方面：一是使生物大分子发生交联聚合和脂褐素堆积；二是使器官组织细胞破坏和减少；三是使免疫功能降低。皮肤中自由基的过度产生容易导致皮肤干燥、粗糙、松弛、弹性下降，因此具有清除自由基能力或者提高细胞自身抗氧能力的原料成为护肤品中的一类重要添加剂。

当暴露于亲电子试剂或活性氧刺激时，机体自身能诱导出一系列的保护性蛋白，以缓解细胞所受的损害。这一协调反应是由保护性蛋白DNA上游调节区的抗氧化反应元件(ARE)来调控的。目前已有成熟方法，将表达luciferase荧光酶的一段报告基因转染到293T细胞的ARE序列之后，通过检测luciferase的表达量来反映ARE的激活状态，从而让我们了解ARE 调控的抗氧蛋白的表达情况。也就是说，使用luciferase的底物与细胞裂解液反映，所测得的荧光值强弱，就能对应细胞表达的抗氧蛋白的多少，体现其自身的抗氧化能力。

我国中医药资源丰富，为我们寻找优越的抗氧化添加剂提供了基础。肉苁蓉(Herba Cistanche)Cistanche deserticolaY.C.Ma(c.dor)为列当科 (Orobanchaeceae)肉苁蓉属(Cistanche)多年生高等寄生植物，其味甘咸微辛酸、微温，在《神农百草经》中列为上品，具有补肾益精、润肠通便和延缓衰老等功效，被誉为“沙漠人参”。别名大芸、寸芸、苁蓉、纵蓉、肉松蓉、精笋、地精、查干告亚(蒙语)。长期的药学实践和大量近代药理学研究表明，它具有提高机体的免疫功能，促进DNA合成，增强体力，提高智能，还有抗衰老等方面的作用。同时，肉苁蓉多糖作为肉苁蓉药材的主要功效成分之一，也有许多报道称其有抗衰老、抗氧化等方面的作用。

例如，中国专利申请CN201110039116.2公开了一种肉苁蓉提取物提取方法及其应用。具体说，该申请公开了属于药用植物应用研究技术领域的一种肉苁蓉提取物提取方法及其应用。该提取物来源于列当科肉苁蓉属的荒漠肉苁蓉或管花肉苁蓉。将肉苁蓉的干燥肉质茎磨成粉末，通过回流提取、过滤、药渣再回流提取、冰冻干燥仪干燥得到棕色粉末，即为肉苁蓉提取物。本发明的肉苁蓉提取物可激活免疫系统，增加免疫器官脾脏的重量，治疗肠癌，减少肠道增生的发生，保护正常的肠道表皮细胞，减少肠道幽门杆菌感染。