[发明专利]金银花的检测试剂盒和检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种金银花的检测试剂盒和检测方法。

背景技术

金银花，又名忍冬(学名：Lonicera japonica)。药材金银花为忍冬科忍冬属植物忍冬及同属植物干燥花蕾或带初开的花。金银花自古被誉为清热解毒的良药。它性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等症，均效果显著。现代研究证明，金银花含有绿原酸、木犀草素苷等药理活性成分，对溶血性链球菌、金黄葡萄球菌等多种致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有较强的抑制力，另外还可增强免疫力、抗早孕、护肝、抗肿瘤、消炎、解热、止血(凝血)、抑制肠道吸收胆固醇等，其临床用途非常广泛，可与其它药物配伍用于治疗呼吸道感染、菌痢、急性泌尿系统感染、高血压等40余种病症。

金银花药用价值和保健用途广泛，社会需求量大。市场上经常出现以其他植物冒充金银花使用，目前，最为常见的金银花伪品是山银花，山银花是忍冬科植物山银花的干燥花蕾或带初开的花。目前金银花伪品的检测通常以颜色、形状等性状为标准进行鉴别，不易掌握，具有一定的局限性。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种新的、方便准确的金银花检测试剂盒和检测方法。

本发明提供了SEQ ID NO.1～3所示的3种核苷酸序列。

本发明还提供了检测SEQ ID NO.1～3任意一项所示核苷酸序列的试剂在制备金银花检测试剂中的用途。

所述检测SEQ ID NO.1～3任意一项所述核苷酸序列的试剂包括扩增SEQ ID NO.1～3任意一项所示核苷酸序列的试剂。

所述扩增的试剂包括SEQ ID NO.5～6、SEQ ID NO.7～8或SEQ ID NO.9～10所示的引物对。

本发明检测金银花的试剂盒，包括检测SEQ ID NO.1～3任意一项所述核苷酸序列的相关试剂。

所述试剂包括扩增SEQ ID NO.1～3任意一项所示核苷酸序列的试剂。

所述扩增的试剂包括SEQ ID NO.5～6、SEQ ID NO.7～8或SEQ ID NO.9～10所示的引物对。

优选地，所述金银花是产自美国休斯顿、广东深圳或四川乐山的金银花。

本发明一种金银花的检测方法，包括如下步骤：

a，提取金银花样本DNA：提取待检样本中的DNA；

b，检测：用前述的试剂盒检测待检样本，即可。

优选地，所述金银花是产自美国休斯顿、广东深圳或四川乐山的金银花。

本发明SEQ ID NO.1～3所示核苷酸序列为金银花特异性序列，通过检测这些序列可以有效区分金银花和山银花，鉴定待检样本是否为金银花，保证食品安全，本发明方法操作简便，具有良好的应用前景。

下面通过具体实施方式对本发明做进一步详细说明，但是并不是对本发明的限制，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更，都是本发明保护的内容。

附图说明

图1用于克隆的RAPD扩增片段。a.用所示的高GC引物FY-27扩增后用于克隆的JYHGC1和JYHGC 2片段。b.用所示的高GC引物FY-28扩增后用于克隆的JYHGC6片段。c.用所示的高GC引物FY-29扩增后用于克隆的JYHGC7片段。通道“M”为标明DNA分子量大小的DL2000DNA标记。

图2所克隆的片段通过测序后获得的DNA序列信息。a.克隆JYHGC1-1的DNA序列。b.克隆JYHGC2-1的DNA序列。c.克隆JYHGC7-2的DNA序列。d.克隆JYHGC6-2的DNA序列。

图3SCAR标记JYHGC1-1,JYHGC2-1,JYHGC7-2和JYHGC6-2在各物种的检测。通道1-5是从广东深圳、湖北宜昌、四川峨眉和乐山、湖南娄底来的5种金银花；通道6-7是福建和海南桂圆；通道8-9是凸灵芝和红芝；通道10是栀子花；通道11是广东荔枝；通道12从广西采集的野生龙荔；通道13泸州青果；通道14是四川凉山天麻；通道15是地丁；通道16是四川古蔺的赶黄草；通道17是沟景天；通道18是大鼠肝脏。