[发明专利]一种能抑制霉菌并降解霉菌毒素的生态修复菌剂

说明书

技术领域

 本发明属于微生物发酵技术，特别是一种能抑制霉菌并降解霉菌毒素的生态修复菌剂。

背景技术

饲料的霉菌污染是直接影响养殖业产品质量重要因素。据联合国粮农组织（FAO）估算，目前世界上至少有25%的谷物被霉菌和霉菌毒素污染，每年所造成的经济损失高达数亿美元。我国霉菌和霉菌毒素污染状况更不容乐观，仅北京地区，谷物霉菌毒素污染率竟达90%，其中严重污染而应当禁用的达15-25%。在气候温暖的南方地区霉菌污染情况更为严重。霉菌一般都会产生霉菌毒素，如常见的黄曲霉会产生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素是毒性最强、危害最大的。黄曲霉毒素能引起肝坏死、降低生产效率，导致先天性缺陷、促进肿瘤产生以及抑制免疫系统等。危害较大的霉菌毒素还有：玉米赤霉烯酮（F2毒素）、呕吐毒素和单端孢霉烯酮（T2毒素），这些毒素均由镰刀菌产生，也都具有强烈的毒性，对动物、植物和人体危害极大。导致人参种植重茬病产生的主要原因是人参土壤内受到镰刀菌【霉菌的一种，能产生玉米赤霉烯酮（F2毒素）、呕吐毒素和单端孢霉烯酮（T2毒素）等】及其所产毒素的污染。

谷物饲料的防霉，除严格控制水分，尽量缩短储藏等措施外，添加防霉剂，防止谷物饲料霉菌污染是更重要的措施。传统的物理和化学方法去除霉菌毒素存在效果不稳定、营养成分损失大、饲料适口性差，难以规模化生产等缺点，较难广泛用于生产实践。微生物及生物酶解毒因具有效率高、特异性强、对饲料和环境无污染等特点和优势，备受研究者的关注。霉菌毒素生物降解指微生物、植物及其代谢产生的酶与毒素作用，使其分子结构中毒性基团被破坏而生成无毒降解产物的过程.目前，市场上存在的防霉剂主要有丙酸盐类、苯甲酸及其盐、山梨酸及其盐等。这些防霉剂，具有较广的抗菌谱，对霉菌和其它真菌、酵母菌等都有一定的抑制作用。但是，这些防霉剂仅能抑制霉菌，并不能分解或促进霉菌毒素分解。土壤消毒剂也仅是杀灭一些霉菌，也不能降解霉菌所产的毒素。因此，筛选多种有效菌，不仅抑制霉菌并且能够降解霉菌所产毒素，是势在必行，是更科学、更有意义的技术方法。制成微生物饲料添加剂（吸附于灭菌麦麸），用于修复动物肠道生态系统。若制成土壤生态修复剂（吸附于秸秆生物炭），可以修复因霉菌和霉菌毒素污染造成的重茬病生态系统。

发明内容

本发明目的在于针对上述存在问题，提供一种高密度、高活性的能抑制霉菌并降解霉菌毒素的生态修复菌剂。

本发明的技术方案：

一种能抑制霉菌并降解霉菌毒素的生态修复菌剂，由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis ACCC10619）、沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris ACCC10649 ）、粪肠球菌（Enterococcus faecalis ACCC10180）、黄杆菌（Wautersiellfalsenii,新分离,ACCC19729）和产朊假丝酵母（Candida utilis ACCC20060）混合组成，其中枯草芽孢杆菌、沼泽红假单胞菌、粪肠球菌和产朊假丝酵母购于中国农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC），也是农业部允许在微生物饲料添加剂中使用的菌种，黄杆菌是从吉林省通化市人参种植土中新分离的菌种，经ACCC基因鉴定为黄杆菌（Wautersiellfalsenii），已经送中国农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）保藏。

一种所述能抑制霉菌并降解霉菌毒素的生态修复菌剂的制备方法，将菌种分别接种于相应的无菌培养基中进行发酵，经过三级扩大培养，最后吸附、固化于秸秆生物炭上制得固体菌剂，具体步骤如下：

    1）将冰箱冷藏保存的各斜面菌种活化后，分别经摇瓶扩大培养制成一级种子液；

2）将上述各菌种一级种子液分别在灭菌培养基内进行二级扩大培养制成二级扩大培养液，枯草芽胞杆菌、沼泽红假单胞菌、粪肠球菌和黄杆菌培养条件是：接种量为5-10wt%、温度37±1℃、pH值7.0±0.2、搅拌速度100-150r/min、压力0.05MPa，产朊假丝酵母的培养条件是：温度30±1℃，其它培养条件与上述四个种菌种相同。

3）将上述各菌种二级培养液分别在灭菌培养基内进行三级扩大培养制成三级扩大培养液，枯草芽胞杆菌、沼泽红假单胞菌、粪肠球菌和黄杆菌培养条件是：接种量5-10wt%、温度37±1℃、pH值7.0±0.2、搅拌速度200-250r/min、压力0.05 MPa；产朊假丝酵母扩大培养条件是：温度30±1℃. 其它培养条件与上述四种细菌相同。