[发明专利]trnH-psbA序列作为DNA条形码在鉴定南湖菱中的应用及鉴定方法有效
| 申请号： | 201410509124.2 | 申请日： | 2014-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN104293935A | 公开（公告）日： | 2015-01-21 |
| 发明（设计）人： | 李军;李白;高广春;黄嬛 | 申请（专利权）人： | 浙江省嘉兴市农业科学研究院（所） |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 314016 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | trnh psba 序列 作为 dna 条形码 鉴定 南湖 中的 应用 方法 | ||
【权利要求书】：
1.trnH-psbA序列作为DNA条形码在鉴定南湖菱中的应用。
2.trnH-psbA序列作为DNA条形码在制备鉴定南湖菱试剂盒中的应用。
3.一种鉴定南湖菱的方法，包括以下步骤：
利用PCR扩增待测样品的trnH-psbA序列并进行测序，如果trnH-psbA序列的278bp碱基为A、308bp碱基为T，则判定待测样品为南湖菱。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系为：
10×PCRbuffer，2μL；dNTP mixture，0.5μL；10μM上游引物，0.5μL；10μM下游引物，0.5μL；样品DNA1μL；Taq DNA聚合酶，0.2μL；补充无菌水至20μL。
5.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的引物对为：
上游引物：5’-TCCGCCCCTTACTTTCTTCC-3’
下游引物：5’-CGTAATGCTCACAACTTCCCT-3’。
6.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应条件为：
94℃预变性5min；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸1min，共36个循环；72℃延伸10min；4℃保温5min。
7.一种鉴定南湖菱的DNA条形码，其特征在于，碱基序列如SEQ ID NO.1所示。
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