[发明专利]提取雷帕霉素的方法在审
申请号: | 201410511513.9 | 申请日: | 2014-09-29 |
公开(公告)号: | CN104262358A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 虞小平;殷侃 | 申请(专利权)人: | 常州兰陵制药有限公司 |
主分类号: | C07D498/18 | 分类号: | C07D498/18 |
代理公司: | 常州市江海阳光知识产权代理有限公司 32214 | 代理人: | 孙晓晖 |
地址: | 213022 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 提取 霉素 方法 | ||
1.一种提取雷帕霉素的方法,具有以下步骤:
①将含有雷帕霉素的发酵液过滤,滤饼用有机溶剂抽提后,再次过滤,滤液经浓缩后,得到第一浓缩液;
②将步骤①得到的第一浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附后,洗脱大孔吸附树脂柱,并将收集的洗脱液浓缩,得到第二浓缩液;
③将步骤②得到的第二浓缩液萃取后再浓缩,得到第三浓缩液;
④将步骤③得到的第三浓缩液经柱层析后再次洗脱,并将收集的洗脱液再次浓缩,得到第四浓缩液;
⑤将步骤④得到的第四浓缩液结晶后,再重结晶,得到雷帕霉素;
其特征在于:步骤②中采用的大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂,洗脱采用的溶剂为丙酮。
2.根据权利要求1所述的提取雷帕霉素的方法,其特征在于:步骤②中的洗脱过程如下:先用体积分数为10%~30%的丙酮清洗大孔吸附树脂2~8个柱体积,然后再用体积分数为20%~50%的丙酮清洗大孔吸附树脂2~8个柱体积,接着用体积分数为30%~60%的丙酮清洗大孔树脂2~8个柱体积,直至TLC检测发现流出液中含有雷帕霉素,最后用体积分数为60%~90%的丙酮清洗大孔吸附树脂直至TLC检测发现流出液中不含雷帕霉素。
3.根据权利要求2所述的提取雷帕霉素的方法,其特征在于:步骤②中的洗脱过程如下:先用体积分数为20%的丙酮清洗大孔吸附树脂5个柱体积,然后再用体积分数为35%的丙酮清洗大孔吸附树脂5个柱体积,接着用体积分数为50%的丙酮清洗大孔树脂5个柱体积,直至TLC检测发现流出液中含有雷帕霉素,最后用体积分数为80%的丙酮清洗大孔吸附树脂直至TLC检测发现流出液中不含雷帕霉素。
4.根据权利要求1至3之一所述的提取雷帕霉素的方法,其特征在于:上述步骤②中所述的浓缩为离心薄膜浓缩。
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