[发明专利]一种发酵生产安普霉素的方法在审
申请号: | 201410512424.6 | 申请日: | 2014-09-28 |
公开(公告)号: | CN104232709A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | 李可乐;刘聪洁;袁昉;王绘砖;李敏 | 申请(专利权)人: | 河北圣雪大成制药有限责任公司 |
主分类号: | C12P19/48 | 分类号: | C12P19/48;C12R1/465 |
代理公司: | 石家庄元汇专利代理事务所(特殊普通合伙) 13115 | 代理人: | 刘闻铎 |
地址: | 051430 河*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 发酵 生产 霉素 方法 | ||
1.一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,包括以下操作步骤:
a.斜面培养:将黑暗链霉菌生产菌株砂土孢子接种于斜面培养基中,每支斜面的砂土孢子接种量为0.003-0.005g,在温度37.0±1℃、湿度30-60%的条件下培养120-144h,得到斜面孢子;
b.种子液培养:将步骤a制备得到的斜面孢子接种于种瓶培养基中,斜面孢子的接种量为1-4cm2,种瓶培养基的装量为500mL装液50mL。在温度37.0±1℃、湿度30-60%、转速180-200rpm的条件下培养20-24h,得到种子液;
c.发酵培养:将步骤b制备得到的种子液接种于发酵培养基中,种子液的接种量为发酵培养基体积的5%,在温度37.0±1℃、湿度30-60%、转速200-220rpm的条件下培养40-48h,随后加入玉米浆继续培养80-96h,即得到含有安普霉素的发酵液。
2.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤a中,斜面培养基按质量百分比的组成为:玉米淀粉2.0%-2.5%、硝酸钾0.1%-0.2%、硫酸镁0.025%-0.05%、氯化钠0.04%-0.06%、磷酸二氢钾0.04%-0.06%、酵母粉0.1%-0.2%、碳酸钙0.1%-0.3%、琼脂2.0%-2.5%。
3.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤a中,湿度为40-50%,培养的时间为140h。
4.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤b中,种瓶培养基按质量百分比的组成为:葡萄糖2.0%-2.5%、玉米淀粉1.5%-2.0%、低温黄豆饼粉2.0%-3.0%、碳酸钙0.2%-0.4%、硫酸镁0.05%-0.1%、酵母粉0.1%-0.3%、硫酸铵0.1%-0.15%、玉米浆1%-2%。
5.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤b中,湿度为40-50%,转速为180rpm,培养的时间为22h。
6.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤c中,发酵培养基按质量百分比的组成为:低温黄豆饼粉3.0%-4.0%、玉米淀粉5.0%-7.0%、碳酸钙0.4%-0.5%、磷酸二氢钾0.1%-0.2%、氯化铵0.6%-0.7%、硫酸锌0.02%-0.03%、硫酸镁0.05%-0.1%、淀粉酶0.1%-0.15%。
7.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤c中,湿度为40-50%,转速为220rpm,培养45h后,加入玉米浆后继续培养90h。
8.根据权利要求1所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述步骤c中,玉米浆的加入量为发酵液体积的0.5%-1.0%。
9.根据权利要求8所述的一种发酵生产安普霉素的方法,其特征在于,所述玉米浆的加入量为发酵液体积的0.7%。
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