[发明专利]毛细管电泳在线反应分离蛋白质‑寡核酸复合物的方法

权利要求书

1.一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述方法步骤如下：

对反应物进行毛细管区带电泳，进样顺序先后依次为：毛细管中迁移速率慢的反应物，电泳缓冲溶液，毛细管中迁移速率快的反应物，使迁移速率不同的反应物在所述电泳过程的毛细管中实现在线反应混和后完成电泳，分离收集电泳产物，对所述产物进行毛细管电泳-激光诱导荧光检测；所述反应物为蛋白质和ssDNA。

2.根据权利要求1所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：在电泳缓冲液中加入反应物之一。

3.根据权利要求1所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述反应物在毛细管中的迁移速率通过分别对反应物进行毛细管区带电泳，根据所述反应物的出峰时间确定，先出峰的反应物迁移速率快。

4.根据权利要求1所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述反应物通过以下方法制成样品溶液进样：将蛋白质溶于纯水中制成原始蛋白质储备液，将ssDNA溶于纯水中制备成原始ssDNA储备液；将原始蛋白质储备液稀释后得到蛋白质样品溶液，将原始ssDNA储备液稀释后得到ssDNA样品溶液。

5.根据权利要求1所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述毛细管为涂层毛细管。

6.根据权利要求1、2、4或5所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：使用Beckman P/ACE MDQ毛细管电泳仪进行所述电泳，毛细管总长度为50.2cm，有效长度为40cm，内径为75μm，电泳缓冲液为硼酸硼砂溶液，进样条件为：蛋白质进样：0.5psi，20s，电泳缓冲液进样：0.5psi，10s，ssDNA进样：0.5psi，10s，分析条件为：分析温度为25℃，分析电压为-15kV，毛细管电泳-激光诱导荧光检测条件为：激发波长488nm，发射波长520nm。

7.根据权利要求3所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述毛细管为涂层毛细管。

8.根据权利要求3或7所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：使用Agilent 7100毛细管电泳仪进行所述电泳，涂层毛细管总长度为48.5cm，有效长度为40cm，内径为75μm，电泳缓冲液为硼酸硼砂溶液，进样条件为：50mbar下，进样3s～25s，分析条件为：分析温度25℃，分析电压-15kV；使用UV 195nm进行检测。

9.根据权利要求6所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述硼酸硼砂溶液的pH值为8.7。

10.根据权利要求8所述的一种毛细管电泳在线反应分离蛋白质-寡核酸复合物的方法，其特征在于：所述硼酸硼砂溶液的pH值为8.7。