[发明专利]一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法

权利要求书

1.一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)采用常压室温等离子体处理那西肽活跃链霉菌150s；

(2)将诱变后待筛选的那西肽活跃链霉菌稀释涂布于固体平板，在37±0.5℃下培养72h；

(3)用牙签挑取诱变后的单菌落孢子接入每孔装有4～6mL固体培养基的24深孔板中进行固体培养，同时一一对应地用接种铲挖0.2～0.3cm2的菌体接入装有2.55mL种子培养基的24深孔板进行液体培养；种子培养结束分别转接装有0.93mL发酵培养基的24深孔板，发酵培养结束测效价，对应的固体培养孔板菌落作保存，液体培养28±0.5℃，转速260r/min，种子培养40h，发酵120h，固体培养37±0.5℃，72h；

(4)接种24深孔板固体培养的菌落于斜面试管培养好后用于摇瓶发酵，测效价。

2.如权利要求1所述的那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，在步骤(3)中，种子培养基(％)为：豆饼粉2.0，葡萄糖3.0，玉米浆2.0，MgSO₄·7H₂O 0.05，(NH₄)₂SO₄ 0.3，轻质碳酸钙0.5，115℃灭菌25min。

3.如权利要求2所述的那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述固体培养基(％)为：可溶性淀粉2，豆饼粉0.5，KNO₃ 0.1，NaCl 0.05，MgSO₄·7H₂O 0.05，K₂HPO₄·3H₂O 0.05，FeSO₄·7H₂O 0.001，琼脂2.0-3.0，121℃灭菌20min；步骤(3)中所述的种子培养基(％)：豆饼粉2.0，葡萄糖3.0，玉米浆2.0，MgSO₄·7H₂O 0.05，(NH₄)₂SO₄ 0.3，轻质碳酸钙0.5，115℃灭菌25min。

4.如权利要求3所述的那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述发酵培养基(％)为：淀粉7.0，淀粉酶(淀粉的0.1％)，葡萄糖0.5，酵母粉0.2，黄豆粉(含油)4.0，(NH₄)₂SO₄ 0.1，KNO₃ 0.05，NaCl 0.4，轻质碳酸钙0.4，115℃灭菌25min。