[发明专利]一种变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法

权利要求书

1.一种变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于，在发酵罐发酵阶段具体步 骤如下：

将发酵菌种的一级种子罐发酵液以6％接种量接入发酵罐，培养温度27-30℃，搅拌速度 120-180r/min，通风量(V/V)1:1-3,培养时间10-15h；然后以1-2℃/h降温速率缓慢降温至 10-15℃，恒温培养15-20h；继续以1-2℃/h降温速率缓慢降温至2-5℃，此时，继续将一级 种子罐发酵液以4％接种量追加接入发酵罐，恒温培养20-30h；最后以1-2℃/h升温速率缓慢 升温至10-15℃，恒温培养15-20h；继续以1-2℃/h升温速率缓慢升温至27-30℃，恒温培养 15-20h；

补料控制：当发酵液中的还原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml时，开始添加补料培养基，补 料量以维持发酵液还原糖含量为2mg/ml-5mg/ml；

放罐标准：60-80％菌体衰老自溶，酶活力增长缓慢；

发酵液经过滤、浓缩、调配、精滤、干燥得耐高温真菌α-淀粉酶。

2.如权利要求1所述的变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于，发酵培养 基组成为：麦芽糊精50-150g，玉米粉50-60g，豆饼粉15-25g，剂粉30-50g，海藻糖30-40g， 酵母粉4-8g，玉米浆1-5g，硫酸铵1-3g，磷酸氢二钾1-2g，磷酸二氢钾1-2g，柠檬酸钠 1-5g，消泡剂0.1-1g,纯净水l000mL，pH值5-6.5，121℃灭菌20min；

3.如权利要求1所述的变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于，所述补料 培养基重量组成为：麦芽糊精20-30％，玉米粉10-20％，豆粉15-25％，不足部分纯净水补足， pH值5-6.5，121-123℃灭菌30-40min。

4.如权利要求1中所述的一种变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于，所 述所述产耐高温真菌α-淀粉酶的菌株具体为里氏木霉901-18Trichodermareesei901-18，保藏 号为CCTCCNO:M2013602。

5.如权利要求1中所述的一种变温调节生产耐高温真菌α-淀粉酶的方法，其特征在于，在 发酵罐发酵阶段具体步骤如下：

将一级种子罐发酵液以6％接种量接入发酵罐，培养温度30℃，搅拌速度150r/min，通风 量(V/V)1:2,培养时间12h；然后以2℃/h降温速率缓慢降温至12℃，恒温培养18h；继续 以2℃/h降温速率缓慢降温至4℃，此时，将步骤(2)中一级种子罐发酵液以4％接种量追加 接入发酵罐，恒温培养25h；最后以2℃/h升温速率缓慢升温至12℃，恒温培养18h；继续 以2℃/h升温速率缓慢升温至30℃，恒温培养18h；

补料控制：当发酵液中的还原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml时，开始添加补料培养基，补 料量以维持发酵液还原糖含量为2mg/ml-5mg/ml；

放罐标准：70％菌体衰老自溶，酶活力增长缓慢。

所述发酵培养基组成为：麦芽糊精100g，玉米粉55g，豆饼粉20g，海藻糖35g，酵母 粉6g，玉米浆3g，硫酸铵2g，磷酸氢二钾2g，磷酸二氢钾2g，柠檬酸钠3g，消泡剂0.5g, 纯净水l000mL，pH值5.5，121℃灭菌20min；

所述补料培养基重量组成为：麦芽糊精25％，玉米粉15％，豆粉20％，不足部分纯净 水补足，pH值5.5，123℃灭菌40min。