[发明专利]一种胆硫乳琼脂培养基及其应用

说明书

技术领域

本发明为微生物领域，特别涉及一种胆硫乳琼脂培养基及其应用。

背景技术

沙门氏菌病的病原体。属肠杆菌科，革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种(或菌株)。按其抗原成分，可沙门氏菌分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。其中与人体疾病有关的主要有甲组的副伤寒甲杆菌，乙组的副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌，丙组的副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌，丁组的伤寒杆菌和肠炎杆菌等。除伤寒杆菌、副伤寒甲杆菌和副伤寒乙杆菌引起人类的疾病外，大多数仅能目引起家畜、鼠类和禽类等动物的疾病，但有时也可污染人类的食物而引起食物中毒。沙门氏菌在水中不易繁殖，但可生存2-3周，冰箱中可生存3-4个月，在自然环境的粪便中可存活1-2个月。沙门氏菌最适繁殖温度为37℃，在20℃以上即能大量繁殖，因此，低温储存食品是一项重要预防措施。

志贺氏菌属是一类革兰氏阴性杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，通称痢疾杆菌。大小为0.5～0.7×2～3μm，无芽孢，无荚膜，无鞭毛。多数有菌毛。革兰氏阴性杆菌。为兼性厌氧菌，能在普通培养基上生长，形成中等大小，半透明的光滑型菌落。在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。生化反应分解葡萄糖，产酸不产气。VP试验阴性，不分解尿素，不形成硫化氢，不能利用枸橼酸盐作为碳源。宋内氏志贺氏菌能迟缓发酵乳糖(37℃3～4天)。

培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基)，较长时间的贮存，必须放在3～6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，现在均改制成粉末。

培养基根据化学分类为天然培养基、组合培养基和半组合培养基；根据物理分类为液体培养基、固定培养基和脱水培养基；根据微生物分类为选择性培养基、鉴别培养基。

发明内容

本发明克服现有技术中的不足，提供一种胆硫乳琼脂培养基及其应用。

本发明运用生物化学，微生物学及无机、有机、分析化学和荧光技术的原理，对不同的碳源、氮源、无机盐类、维生素、生长促进剂等诸类营养组分的组合进行筛选，对培养基的pH值、离子强度、氧化-还原电势、表面张力、气体环境等物化因子进行了比较，研究出了本发明的培养基。

本发明所采用的技术方案为：

一种胆硫乳琼脂培养基，所述培养基的组分包括20.1g/LGN增菌液、8.0g/L乳糖、2.8g/L硫代硫酸钠、1.5g/L柠檬酸钠、1.5g/L柠檬酸铁铵、0.023g/L中性红、16.5g/L琼脂，pH值为7.1-7.3。

所述GN增菌液为每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氢二钾1.5g、甘露醇3g、枸橼酸钠5.8g、去氧胆酸钠0.33g、氯化钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g。

本发明还公开了所述的胆硫乳琼脂培养基的应用，用于沙门氏菌的选择性分离。

蛋白胨、葡萄糖提供碳源、氮源、维生素和矿物质；乳糖为可发酵的糖类；去氧胆酸钠和柠檬酸钠抑制革兰氏阳性菌及大多数的大肠菌群和变形杆菌，但不影响沙门氏菌的生长；硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；中性红为pH指示剂，发酵糖产酸的菌落呈红色，不发酵糖的菌落为无色；琼脂是培养基的凝固剂。

称取本品65.2g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，待冷至60℃，倾入无菌平皿。无需高压灭菌。

本发明的有益效果：

1、培养基组方简单，制备操作方便，成本低，利于推广应用；

2、菌生长迅速，变异率低；

3、便于观察，分析。

具体实施方式

实施例1：

一种胆硫乳琼脂培养基，所述培养基的组分包括20.1g/LGN增菌液、8.0g/L乳糖、2.8g/L硫代硫酸钠、1.5g/L柠檬酸钠、1.5g/L柠檬酸铁铵、0.023g/L中性红、16.5g/L琼脂，pH值为7.1-7.3。

所述GN增菌液为每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氢二钾1.5g、甘露醇3g、枸橼酸钠5.8g、去氧胆酸钠0.33g、氯化钠5.0g、磷酸氢二钾2.0g。