[发明专利]一种用于中药/天然药物成分分离的组合式色谱柱以及柱色谱方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于中药/天然药物成分分离的组合式色谱柱以及柱色谱方法。

背景技术

柱色谱是较经典的有机物分离技术，原理和薄层色谱相同，但装置有所不同，主要由一根玻璃柱和填充填料组成。最常见的柱色谱是硅胶色谱、氧化铝色谱、离子交换柱色谱、聚酰胺柱色谱和凝胶柱色谱、大孔树脂柱色谱等。

目前的色谱分离操作中，是将待分离物上样，再从顶端加入流动相，利用固定相和流动相的极性差异，将化合物洗脱出色谱柱，从而根据极性大小将待分离物中多种化合物分离开。按此分离方法，一旦上样，就需要通过流动相将柱顶端或柱身的目标成分或成分群或杂质洗脱至底端，再通过放液阀排出后，再另行收集。若先洗脱得到的是目标成分或成分群，则后期无需再另行洗脱；但若先洗脱得到的是杂质，则后期还需要使用大量流动相将目标成分或成分群洗脱出来，不仅费时，洗脱成本也非常高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够简化柱色谱操作的组合式色谱柱。本发明还提供了基于上述组合式色谱柱的柱色谱方法。

本发明提供了一种组合式色谱柱，它是由至少2根固定相装填管组合而成，每两根固定相装填管间均通过密封固定器上下连通；最底端的固定相装填管底部设有放液阀。

本发明中，固定相装填管的长度、数量可根据不同实验需要作出适应性调节。

进一步地，所述固定相装填管的材质为石英玻璃或普通玻璃。

进一步地，所述密封固定器由中空固定座和置于固定座内的密封圈组成；固定座内壁为柱状；固定相装填管和密封圈的外径均与固定座内径适配；固定相装填管的管口与密封圈接触。

更进一步地，所述密封圈、固定相装填管二者的内径相同。

进一步地，所述密封固定器由中空固定座和置于固定座内的2条密封圈组成；固定座内壁为柱状，内壁上还设有一环状凸起，2条密封圈分别置于环状凸起两端；固定相装填管和密封圈的外径均与固定座内径适配。

更进一步地，所述环状凸起、密封圈和固定相装填管三者的内径相同。以保证该组合式色谱柱内壁光滑。

优选地，所述固定座上还设有固定支架。

其中，所述固定座的材质为聚四氟乙烯。

其中，所述密封圈的材质为膨体聚四氟乙烯或全氟橡胶。

本发明还提供了一种柱色谱方法，它是用上述组合式色谱柱和适当吸附剂进行洗脱分离。

其中，它包括如下操作步骤：

(1)取上所述组合式色谱柱，安装固定，装入吸附剂，取待分离物，上样；

(2)以流动相进行洗脱，待各成分或成分群在色谱柱中分离，关停放液阀，将色谱柱拆卸，分别取出含有相应成分或成分群的吸附剂，加入溶剂提取，即可得到需分离的成分或成分群。

或再将提取液重复上述操作，进行二次、三次……分离等，即可得到需分离的成分或成分群；此步骤亦可表示为“再将提取液重复步骤(1)、(2)的操作，再进行n次分离，即可得到需分离的成分或成分群，其中，n为正整数”。

洗脱完成后，每一根固定相装填管中的吸附剂均吸附有源自样品中的部分成分或成分群，这些成分或成分群与其所在的吸附剂之间存在相互对应的关系，本发明将这种吸附剂称之为“含有相应成分或成分群的吸附剂”。若取出该吸附剂，加入溶剂提取后，即可将吸附剂中对应的成分或成分群分离出来。

本发明所述成分群，是指某一类结构或极性相近似的化合物的统称，在本领域中也常称为提取部位。

在实际操作过程中，流动相条件可以根据预实验确定(如薄层色谱)，亦可采用本发明色谱方法进行洗脱、分析和调整。

进一步地，所述固定相为硅胶、氧化铝、离子交换树脂、聚酰胺、凝胶或大孔吸附树脂。

本发明色谱分离方法：

1、在实验中，采用本发明方法湿法装柱分离厚朴样品时，整个分离过程用时约6h，而采用常规色谱柱和湿法装柱，分离相同样品量用时约1周，耗时长。色带在向下洗脱过程中逐渐变宽，分离度降低，且消耗更多洗脱剂。