[发明专利]用于猕猴桃杂交群体雌雄性别鉴定的SSR分子标记A002

权利要求书

1.一种用于猕猴桃杂交群体雌雄性别鉴定的SSR分子标记A002，其特征在于：

SSR分子标记A002的扩增引物序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；

扩增得到的雄株特异片段核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；

扩增得到的雌株特异片段核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.按权利要求1所述的SSR分子标记A002的获得方法，其特征在于包括下列步骤：

①构建猕猴桃高密度遗传图谱；

②收集性别表型转换为表型标记；

③在遗传图谱上定位表型标记；

④在基因组序列上确定性别决定区间

整理性别表型标记附近的SNP分子标记A002，将SNP标记A002的核苷酸序列比对到猕猴桃基因组序列；比对结果显示性别表型标记邻近的SNP标记均来自于第25号染色体上，具体位置在2Mb附近；因此，将猕猴桃性别相关区段锁定在第25号染色体的1.5-2.5Mb区间内；

⑤筛选性别决定区间内SSR标记提取猕猴桃基因组第25号染色体上1.5-2.5Mb区间的核苷酸序列，搜索到有功能的简单重复序列30个；利用Primer5.0软件，针对简单重复序列设计扩增引物；利用设计合成的引物，对猕猴桃雌株和雄株进行PCR扩增，摸索合适的扩增条件，保证扩增条带的清晰度和稳定性；筛选得到本分子标记能在雄株和雌株中各扩增得到一条特征谱带。

3.按权利要求1所述的SSR分子标记A002的扩增引物SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4在山梨猕猴桃和中华猕猴桃‘桂海4号’杂交群体中进行雌雄性别鉴定的应用。