[发明专利]牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法

权利要求书

1.一种牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法，其特征在于：它包括如下步骤：

步骤一：牛角瓜外植体的取材

牛角瓜生长季节或新萌发的2-4厘米侧芽或顶芽或其他部位新芽或新萌发的茎段、茎尖、根系、叶片或新开花的花序、花瓣、子房、花药、花托及果实、种子；

步骤二：培养基配制

培养基A：牛角瓜诱导培养基 

MS 600-700mg/L、6-BA 0.3-2 mg/L、NAA 0.3 mg/L、糖25 mg/L、琼脂粉5 mg/L，用精密试纸或酸度计调整浓度达到pH6.2；

培养基B：牛角瓜丛生芽增殖培养基 

MS 750 mg/L、6-BA 0.3-2 mg/L、NAA 0.2 mg/L、糖25-35 mg/L、琼脂5 mg/L，用精密试纸或酸度计调整浓度达到pH6.2；

培养基C：牛角瓜生根培养基 

MS 700 mg/L、6-BA 1 mg/L、NAA 0.3 mg/L、糖35 mg/L、琼脂粉5 mg/L，用精密试纸或酸度计调整浓度达到pH6.2；

上述培养基中的溶剂为水或蒸馏水；

步骤三：牛角瓜外植体材料灭菌；

步骤四：无菌接种

将已消毒好的牛角瓜外植体材料，经切割或剪裁成小段或小块，放入培养基A中；

步骤五：培养基培养

培养基A培养15天-20天；

培养基B培养15天-20天；

培养基C培养20天-30天；

步骤六：炼苗驯化移栽。

2.根据权利要求1所述的牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法，其特征在于：所述的牛角瓜生根培养步骤为：

（a）将新梢基部浸入培养基C中处理4～8小时后取出24小时；

（b）再浸入培养基C中处理2～4天。

3.根据权利要求1所述的牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法，其特征在于：所述的牛角瓜生根培养步骤为：

（a）将新梢基部浸入培养基C中处理6～8天；

（b）切割粗壮的嫩枝在营养钵基质中直接生根；当牛角瓜增殖的芽体长至1-3厘米，可切下转入生根培养，芽体外观生长状态正常，接种后约30天可顺利生根；按照大苗生根，幼嫩苗进行增殖的原则进行，牛角瓜可顺利发根。

4.根据权利要求1所述的牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法，其特征在于：所述的牛角瓜生根培养步骤为牛角瓜瓶外生根及组培苗移栽管理：

将牛角瓜增殖瓶苗中切下诱根培养的壮苗，取出瓶并在苗基部切一新鲜切口将新梢基部浸入培养基C中处理4～8小时，洗净根系附着的培养基后直接插于苗床的基质中，大约经过25-35天，便开始长根，扦插发根率达95%以上。

5.根据权利要求1或2或3或4所述的牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法，其特征在于：所述的炼苗驯化移栽的具体做法是：

（a）取出牛角瓜瓶苗，用自来水洗净根系附着的培养基，自然晾干水分后，假植于基质中，遮荫通风；

（b）以河砂、泥炭土、珍珠岩以体积比2：1：1混合基质最适宜牛角瓜组培苗的过渡栽培；在培养基质中可掺入75%的百菌清可湿性粉剂200～500倍液，以进行灭菌处理；

同时基质或可以用椰子木屑、河砂、有机液肥以体积比5：1：1混合基质；

（c）必须通过炼苗，根系生长良好优质的牛角瓜壮苗，可全年进行移栽，主要是温度适宜在10℃-20℃以上；有水分或水源或雨水即可；

（d）牛角瓜移栽苗的水肥管理：

当第一次栽下苗床后必须浇水，为定根水；

后期掌握不干不浇的原则，牛角瓜多数叶片肥厚，体内贮水多，相对耐干不耐湿，过于潮湿会出现叶片发黄脱落现象；

牛角瓜移栽苗施肥应薄肥勤施，成苗后提供人工种植。

6.根据权利要求1或2或3或4所述的牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜的组培苗快速繁殖栽培方法，其特征在于：所述的牛角瓜外植体材料灭菌包括：

取下的牛角瓜侧芽或顶芽或新萌发的2-4厘米侧芽或顶芽或其他部位新芽或新萌发的茎段、茎尖、根系、叶片、或新开花的花序、花瓣、子房、花药、花托及果实、种子等离体器官，进行灭菌处理；或

冼洁精洗涤或自来水清冼10 -20分钟或75%乙醇无菌水冲冼1次，或0.1%升汞10分钟-20分钟或无菌水冲冼6遍；或

使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精等等化学药品进行配制灭菌处理；

凡是在人工控制条件下进行培养以获得再生完整牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜新植株技术与方法均为权利范围；

凡利用各地各国各种牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜组织培养操作主要步骤的或增加或减少步骤的：

牛角瓜的外植体-培养基配制-灭菌-接种-培养-驯化移栽－栽培牛角瓜、白花牛角瓜、大牛角瓜组培苗技术过程的技术与方法均为权利范围。