[发明专利]一种选择性地提高生产卤代酸脱卤酶的方法

权利要求书

1.一种选择性地提高生产卤代酸脱卤酶的方法，其特征在于：以 无机盐基础培养基作为基础培养基，将产生L-2-卤代酸脱卤酶的海洋微 生物假单胞菌DEH138种子液，按1:100-1：10(体积比)的比例接种 于含有辅助碳源和诱导物的基础培养基中于25～45℃，200-230rpm摇床 培养；通过两段法或同步法进行培养生产L-2-卤代酸脱卤酶。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：两段法是将DEH138 在含有辅助碳源的基础培养基中培养10～40h，再加入诱导物诱导 10～40h；同步法则是将DEH138在同时含有辅助碳源与诱导物的基础培 养基中培养20～80h。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：辅助碳源包括羟基 乙酸、乳酸、羟基丁酸与葡萄糖中的一种或二种以上，它们于基础培养 基中总和的终浓度为10～30mM；

诱导物包括单氯乙酸、单碘乙酸、2-氟丙酸、2-氯丙酸、2-溴丙酸、3- 氯丙酸、2-氯丁酸、2-溴丁酸、2-氯丙酰胺与2-溴丙酰胺中的一种或二 种以上，它们于基础培养基中总和的终浓度为2～20mM。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：

辅助碳源优选羟基乙酸、乳酸与葡萄糖中的一种或二种以上，它们 于基础培养基中总和的终浓度优选为10～30mM；诱导物包括优选2-氯 丙酸、3-氯丙酸、2-氯丁酸中的一种或二种以上，它们于基础培养基中 总和的终浓度优选为2～20mM。

5.根据权利要求1、2、3或4所述的方法，其特征在于：无机盐 基础培养基含有Na₂HPO₄·12H₂O(12g/L),NaH₂PO₄·2H₂O(1g/L), NaCl(30g/L),酵母浸粉(0.1g/L),(NH₄)₂SO₄(2.0g/L),MgSO₄·7H₂O (0.1g/L)，余量为水，调pH至7.0～7.5。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：海洋微生物假单胞 菌DEH138种子液的OD₆₀₀为0.4～0.6。