[发明专利]与黄瓜果实苦味性状相关的SNP标记及其应用有效

专利信息
申请号: 201410529172.8 申请日: 2014-10-10
公开(公告)号: CN104357441B 公开(公告)日: 2017-08-01
发明(设计)人: 黄三文;尚轶;陈慧明;马永硕;周倩;张忠华 申请(专利权)人: 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12Q1/68
代理公司: 北京路浩知识产权代理有限公司11002 代理人: 王文君
地址: 100081 北*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 黄瓜 果实 苦味 性状 相关 snp 标记 及其 应用
【权利要求书】:

1.用于检测与黄瓜果实苦味性状相关的SNP标记的引物对,所述引物对为:正向引物F5’-TGGTAGGTGTAGCTTAATCATTCTCCTTTG-3’和反向引物R5’-AAGTTGGTGAAGTAATAGTGTCCAACC-3’;

所述与黄瓜果实苦味性状相关的SNP标记位于编码黄瓜转录因子Csa5G157230基因起始密码子上游第1601bp处,此处碱基为G的黄瓜果实表型不稳定,易受到外界环境的影响,在逆境条件下黄瓜果实易变苦,此处碱基为A的黄瓜则不苦;其中,所述逆境条件包括但不限于低温、干旱。

2.权利要求1所述引物对在鉴定苦味黄瓜品种中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:

1)提取待测黄瓜的基因组DNA;

2)以待测黄瓜的基因组DNA为模板,利用所述引物F和R,进行PCR扩增反应;

3)检测PCR扩增产物;

其中,步骤2)中PCR反应使用的扩增体系以20μl计为:10-20ng/μl模板DNA 1μl,10pmol/μl引物F和R各1μl,10mmol/L dNTP mix 0.4μl,0.5U/μL Taq DNA聚合酶0.3μl,10×PCR反应缓冲液2μl,余量为水;

PCR反应条件为:94℃5分钟;94℃20秒,58℃20秒,72℃30秒,35个循环;72℃10分钟。

4.权利要求1所述引物对在黄瓜分子标记辅助育种中的应用。

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