[发明专利]与黄瓜果实苦味性状相关的SNP标记及其应用有效
申请号: | 201410529172.8 | 申请日: | 2014-10-10 |
公开(公告)号: | CN104357441B | 公开(公告)日: | 2017-08-01 |
发明(设计)人: | 黄三文;尚轶;陈慧明;马永硕;周倩;张忠华 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司11002 | 代理人: | 王文君 |
地址: | 100081 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 黄瓜 果实 苦味 性状 相关 snp 标记 及其 应用 | ||
1.用于检测与黄瓜果实苦味性状相关的SNP标记的引物对,所述引物对为:正向引物F5’-TGGTAGGTGTAGCTTAATCATTCTCCTTTG-3’和反向引物R5’-AAGTTGGTGAAGTAATAGTGTCCAACC-3’;
所述与黄瓜果实苦味性状相关的SNP标记位于编码黄瓜转录因子Csa5G157230基因起始密码子上游第1601bp处,此处碱基为G的黄瓜果实表型不稳定,易受到外界环境的影响,在逆境条件下黄瓜果实易变苦,此处碱基为A的黄瓜则不苦;其中,所述逆境条件包括但不限于低温、干旱。
2.权利要求1所述引物对在鉴定苦味黄瓜品种中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取待测黄瓜的基因组DNA;
2)以待测黄瓜的基因组DNA为模板,利用所述引物F和R,进行PCR扩增反应;
3)检测PCR扩增产物;
其中,步骤2)中PCR反应使用的扩增体系以20μl计为:10-20ng/μl模板DNA 1μl,10pmol/μl引物F和R各1μl,10mmol/L dNTP mix 0.4μl,0.5U/μL Taq DNA聚合酶0.3μl,10×PCR反应缓冲液2μl,余量为水;
PCR反应条件为:94℃5分钟;94℃20秒,58℃20秒,72℃30秒,35个循环;72℃10分钟。
4.权利要求1所述引物对在黄瓜分子标记辅助育种中的应用。
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