[发明专利]一种检测大豆凝集素的酶联免疫试剂盒

权利要求书

1.一种检测大豆凝集素的酶联免疫试剂盒，其特征在于：由多孔包被板，缓冲液，大豆凝集素标准品，大豆凝集素的抗体冻干品，酶标记的羊抗鼠抗体，洗涤液所组成。

2.一种根据权利要求1所述检测大豆凝集素的酶联免疫试剂盒的检测方法，包括，免疫原、包被原和单克隆抗体的制备及样本前处理，其特征在于：

（1）将大豆凝集素与牛血清白蛋白偶联，得到免疫原；

（2）选择兔红细胞膜包被酶标板作为功能ELISA捕获大豆凝集素的载体，得到包被原；

（3）用步骤（1）的免疫原免疫小鼠，通过杂交瘤技术，得到分泌抗SBA的单克隆抗体的杂交瘤细胞株；

（4）以体内诱生腹水法大量制备抗体，使用ProteinG柱进行纯化，获得抗SBA的单克隆抗体IgG；

（5）用步骤（2）的包被原包被固相载体；

（6）取适量待测大豆样品，用超细粉碎机粉碎，取lg待铡样品加10ml生理盐水，室温

磁力搅拌浸提2h，9000rpm离心l5min，取上清备用，得到待测物；

（7）将步骤(6)的待榆物进行酶联免疫，对照标准曲线计算样品中的大豆凝集素的含量。

3.根据权利要求l所述检测大豆凝集素的酶联免疫试剂盒的检测

方法，其特征在于：所述的固相载体是多孔包被板，采用48或者96孔的多微孔包被板作为固相载体。

4.根据权利耍求l所述检测大豆凝集素的酶联免疫试剂盒的检测方法，其特征在于：取包被有SBA的的微孔包被板，加入50u]的SBA或处理好的样品到各自的微孔中，加50ul以缓冲液稀释的SBA抗体，25℃反应0.5小时，用洗涤液洗3次，加以缓冲液稀释的l00uL羊抗鼠抗体，25℃反应0.5小时，用洗涤液洗六3次，加底物A、B各50uL，25℃反应15min后终止，测量其吸光度值，从标准曲线计算样品中的SBA的含量。