[发明专利]一种检测细菌的检测组合在审
申请号: | 201410532521.1 | 申请日: | 2014-10-11 |
公开(公告)号: | CN104297474A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 徐锋;魏华;武晓丽;杨栋;陈星星;甘敏;王登远;陈飞;刘琚珥;许恒毅 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 南昌新天下专利商标代理有限公司 36115 | 代理人: | 施秀瑾 |
地址: | 330031 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 细菌 组合 | ||
1.一种检测细菌的检测组合,其特征在于包括单一抗体多重试纸条、荧光染料盒;所述单一抗体多重试纸条,包括样品垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVP底板,其具体结构特征是:硝酸纤维素膜粘贴在PVP底板上;在底板的一端为样品垫,另一端为吸水垫;以宽度为3-4mm/条切条后即为单一抗体多重试纸条;所述的硝酸纤维素膜喷有喷有大肠杆菌O157:H7抗体、单核增生李斯特菌抗体、鼠伤寒沙门氏菌抗体分别作为三条检测线T1、T2、T3线,抗荧光染料抗体喷质控线C线。
2.根据权利要求1所述的检测组合,其特征在于所述的菌为大肠杆菌O157:H7、单核增生李斯特菌、鼠伤寒沙门氏菌。
3.根据权利要求1所述的检测组合,其特征在于所述荧光染料盒装有的荧光染料为碘化丙啶、荧光素双醋酸酯(FDA)、吖啶橙、或SYBR Green;所述抗荧光染料抗体喷涂浓度为质量浓度0.01%。
4.根据权利要求1所述的检测组合,其特征在于所述大肠杆菌O157:H7抗体、单核增生李斯特菌抗体、鼠伤寒沙门氏菌抗体喷涂浓度分别为1mg/mL;并将上述三种抗体分别喷到到硝酸纤维素膜上形成3条检测线。
5.利用权利要求1所述检测细菌的检测组合进行细菌检测的方法,其特征在于包括如下步骤:取待测样品,离心后用荧光染料盒中荧光染料进行染色5 min,用1×PBS洗3遍并重悬沉淀;取20 uL,与1×PBS混合后加至单一抗体多重试纸条的样品垫,反应15min后单一抗体多重试纸条在紫外灯下判定定性结果,检测线处有条带,说明待测样品中有目标菌,结果为阳性;检测线无亮带,说明待测样品中无目标菌,结果为阴性; 利用标准梯度浓度的目标菌分别加入到不同的样品垫上,检测线上荧光强度利用荧光定量光谱仪进行检测,通过梯度浓度的目标菌在检测线上的荧光强度作成标准曲线;读出待测样品在检测线上的荧光强度,对照标准曲线,对待测样品中的目标菌浓度进行定量检测。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于所述的样品为食品样品。
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