[发明专利]突变的核酸和表达载体以及酵母菌株及其制备方法与用途在审
| 申请号： | 201410534692.8 | 申请日： | 2014-10-11 |
| 公开（公告）号： | CN104560969A | 公开（公告）日： | 2015-04-29 |
| 发明（设计）人： | 高岚;郭勇;刘金胜;刘颖;李宝石;蔺建民 | 申请（专利权）人： | 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司石油化工科学研究院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/81;C12N1/19;C12P7/06;C12R1/865 |
| 代理公司： | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人： | 刘国平;顾映芬 |
| 地址： | 100728 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 突变 核酸 表达 载体 以及 酵母 菌株 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种突变的核酸，其特征在于，该突变的核酸的序列如SEQ ID NO:1所示，或者，该突变的核酸的序列由5’端连接有Kozak序列的SEQ ID NO:1组成。
2.根据权利要求1所述的突变的核酸，其中，所述突变的核酸的序列如SEQ ID NO:2所示。
3.一种表达载体，其特征在于，该表达载体插入有权利要求1或2所述的突变的核酸。
4.根据权利要求3所述的表达载体，其中，所述表达载体中的启动子为组成型启动子或诱导型启动子。
5.根据权利要求4所述的表达载体，其中，所述表达载体中的启动子为Padh1启动子、Ppgk启动子或Pfbp启动子。
6.根据权利要求3所述的表达载体，其中，所述表达载体为在质粒pAUR123的BamHI酶切位点和XhoI酶切位点之间插入权利要求1所述的突变的核酸而得到的表达载体。
7.一种制备高抗逆性酵母菌株的方法，其特征在于，该方法包括：使用权利要求3-6中任意一项所述的表达载体转化酵母细胞，得到转化后的酵母细胞。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，该方法还包括：将转化后的酵母细胞在胁迫培养基中进行培养。
9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述胁迫培养基含有1-5g/L的乙酸、1-6g/L的Na2SO4、20-60g/L的NaCl、10-30g/L的KCl、20-40g/L的NH4Ac、20-40g/L的NaAc、5-40g/L的KAc、0.1-0.5g/L的苯酚和0.1-0.5g/L的糠醛中的至少一种。
10.根据权利要求8或9所述的方法，其中，在胁迫培养基中进行培养的条件包括：温度为28-33℃，时间为24-72小时。
11.一种酵母菌株，该酵母菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的菌株，所述酵母菌株的保藏号为CGMCC No.8204。
12.权利要求11所述的酵母菌株在生产乙醇中的用途。
13.一种生产乙醇的方法，该方法包括：用权利要求11所述的酵母菌株对乙醇发酵原液进行乙醇发酵。
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