[发明专利]一种生产亚环己基二氧基庚烯醇的产朊酵母催化法在审
申请号: | 201410537232.0 | 申请日: | 2014-10-13 |
公开(公告)号: | CN104293847A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 刘均洪;李杰 | 申请(专利权)人: | 青岛科技大学 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04;C12R1/72 |
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地址: | 266061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 环己基 二氧 庚烯 酵母 催化 | ||
1.一种产朊假丝酵母细胞生物催化制备(2S,3S)-1,2-(亚环己基二氧基)庚-6-烯-3-醇的方法,其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液,装料系数为0.6-0.7,pH为6.2,加入吸附了底物S-亚环己基甘油醛与4-溴-1-丁烯的白土,使底物S-亚环己基甘油醛添加量为80-90 g/L,底物S-亚环己基甘油醛与底物4-溴-1-丁烯摩尔比为1,麦芽浸膏25-30 g,木糖14-16 g/L,支链化13碳格尔伯特醇聚氧乙烯醚为13-18g/L,121℃高压灭菌30分钟;冷却至30-31℃时,加入湿酵母细胞使浓度为25-28g/L,通气比为0.10-14V/(V分钟),进行生物催化反应,反应时间为82-90小时;反应结束后,分别滤出细胞、白土,用乙酸乙酯萃取反应液、萃取白土,合并乙酸乙酯萃取液和萃取白土的乙酸乙酯,蒸出乙酸乙酯,得到产物(2S,3S)-1,2-(亚环己基二氧基)庚-6-烯-3-醇,反应转化率94-96%,产品收率92-94%,对映体过量率(ee%)97-98%。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于湿酵母细胞制备过程如下:产朊假丝酵母经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液;发酵罐加入培养液,装料系数为0.6-0.7,121℃高压灭菌30分钟,冷却至27-28℃,将产朊假丝酵母种子液接种至发酵罐,接种比例为6-6.5%,通气比为1.4-1.6V/(V分钟),27-28℃培养18-20小时,用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞,用作生物催化反应催化剂。
3. 权利要求1所述的方法,其特征在于种子培养基成份为: 酵母提取物10 g/L,葡萄糖20 g/L,蛋白胨20 g/L,pH6; 配制固体培养基时添加15g/L的琼脂粉;
培养液成份为:葡萄糖18-22 g/L,麦芽浸膏25-30 g/L,木糖8-10 g/L,(NH4)2SO4 4.8-5.3 g/L,KH2PO4 9-11 g/L,MgSO4.7H2O 0.3-0.4 g/L,CaCl2 0.35-0.4 g/L,硫酸铵0.2-0.25g/L,硫酸镁0.3-0.4g/L,pH5.6。
4. 权利要求1所述的方法,其特征在于所述吸附了底物的白土制作方法为,将底物S-亚环己基甘油醛和4-溴-1-丁烯混溶,R-亚环己基甘油醛与4-溴-1-丁烯摩尔比为1,用白土吸收此溶液,即得到吸附了底物的白土,调节底物与白土用量,使得底物与白土的质量比率为0.35-0.38。
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