[发明专利]一种酿酒酵母催化生产手性亚环己基烯醇的方法在审
申请号: | 201410537328.7 | 申请日: | 2014-10-13 |
公开(公告)号: | CN104263774A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 田璐;刘均洪 | 申请(专利权)人: | 青岛科技大学 |
主分类号: | C12P17/04 | 分类号: | C12P17/04;C12R1/865 |
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地址: | 266061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酿酒 酵母 催化 生产 手性 环己基 方法 | ||
1.一种酿酒酵母细胞生物催化制备(1S,3S)-1,2-(亚环己基二氧基)庚-6-烯-3-醇的方法,其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液,装料系数为0.6-0.7,pH为7.5,加入吸附了底物S-亚环己基甘油醛与4-溴-1-丁烯的苎麻纱布,使底物S-亚环己基甘油醛添加量为80-90 g/L,底物S-亚环己基甘油醛与底物4-溴-1-丁烯摩尔比为1,葡萄糖含量为 14-15g/L,木糖16-20 g/L,10碳醇聚氧乙烯醚含量为15-18g/L,121℃高压灭菌30分钟;冷却至27-29℃时,加入湿酵母细胞使浓度为18-20g/L,通气比为0.16-0.2V/(V分钟),进行生物催化反应,反应时间为84-89小时;反应结束后,分别滤出细胞、苎麻纱布,用乙酸乙酯萃取反应液、萃取苎麻纱布,合并乙酸乙酯萃取液和萃取苎麻纱布的乙酸乙酯,蒸出乙酸乙酯,得到产物(1S,3S)-1,2-(亚环己基二氧基)庚-6-烯-3-醇,反应转化率94-96%,产品收率92-94%,对映体过量率(ee%)97-98%。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于湿酵母细胞制备过程如下:酿酒酵母经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液;发酵罐加入培养液,装料系数为0.6-0.7,121℃高压灭菌30分钟,冷却至25-26℃,将酿酒酵母种子液接种至发酵罐,接种比例为7-8%,通气比为0.8-1V/(V分钟),25-26℃培养42-46小时,用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞,用作生物催化反应催化剂。
3. 权利要求1所述的方法,其特征在于培养液成份为:蛋白胨1.5-2 g/L,酵母浸膏8-10 g/L,葡萄糖18-22 g/L,麦芽浸膏25-30 g,硫酸铵0.2-0.25g/L,硫酸镁0.3-0.4g/L,磷酸二氧钾1.8-2.3g/L;固体培养基成份: 在液体培养基中加入2%的琼脂粉。
4. 权利要求1所述的方法,其特征在于所述吸附了底物的苎麻纱布制作方法为,将底物S-亚环己基甘油醛和4-溴-1-丁烯混溶,R-亚环己基甘油醛与4-溴-1-丁烯摩尔比为1,用尺寸为0.5cmX0.5cm的苎麻纱布吸收此溶液,即得到吸附了底物的苎麻纱布,调节底物与苎麻纱布用量,使得底物与苎麻纱布的质量比率为0.33-0.35。
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