[发明专利]一种天然组织来源的脱细胞骨膜材料及其制备方法有效
申请号: | 201410539114.3 | 申请日: | 2014-10-13 |
公开(公告)号: | CN104307045A | 公开(公告)日: | 2015-01-28 |
发明(设计)人: | 林贤丰;陈凯;范顺武 | 申请(专利权)人: | 林贤丰 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 杜军 |
地址: | 325804 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 天然 组织 来源 细胞 骨膜 材料 及其 制备 方法 | ||
1. 一种天然组织来源的脱细胞骨膜材料及其制备方法,其特征在于,该方法具体包括以下步骤:
(1)取任一哺乳动物四肢骨骨膜,摘除骨性碎片,无菌PBS漂洗3次,每次漂洗20分钟,去除血液、残余肌肉组织和脂肪组织;再用去离子水冲洗4小时;
(2)在浓度为5%的含10KIU/ml 蛋白酶抑制剂的PBS缓冲液,恒温45oC摇床200rpm震荡1小时;用去离子水冲洗4小时;
(3)在浓度为5%的含Triton X-100的PBS缓冲液,加入10KIU/ml,10g/ml的混合抗菌液,缓冲液和混合抗菌液体积比为5:1,恒温45oC摇床250rpm震荡48小时;再用去离子水冲洗4小时,所述的混合抗菌液由青霉素和链霉素组成,青霉素和链霉素的体积比为1:1;
(4)在浓度为10%的含SDS的PBS缓冲液,加入10KIU/ml,10g/ml的混合抗菌液,缓冲液和混合抗菌液体积比为5:1,恒温45oC摇床250rpm震荡48小时;用去离子水冲洗4小时,所述的混合抗菌液由青霉素和链霉素组成,青霉素和链霉素的体积比为1:1;
(5)在浓度为1. 5mg/ml的含DNA酶的PBS缓冲液,加入10KIU/ml,10g/ml的混合抗菌液,缓冲液和混合抗菌液体积比为5:1,37oC摇床250rpm震荡12小时;用去离子水冲洗4小时后得到全椎间盘脱细胞支架,所述的混合抗菌液由青霉素和链霉素组成,青霉素和链霉素的体积比为1:1。
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