[发明专利]一种漏斗泡囊草悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410540401.6 | 申请日: | 2014-10-14 |
公开(公告)号: | CN104221869A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | 刘东锋;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京帝道农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 漏斗 泡囊草 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
1. 一种漏斗泡囊草悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养,其主要步骤如下:
(1)取漏斗泡囊草的幼嫩叶片,进行消毒处理;
(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接入TR+IBA0.3mg/L+6-BA5mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,附加7g/L琼脂,30g/L蔗糖,温度25℃;
(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织高温50℃热处理5min,接入培养基TR+ZT0.1-0.15μmol/L+酪蛋白水解氨基酸0.25-0.3g/L中,附加45g/L蔗糖进行悬浮细胞的培养,接种量为1:4,振幅4cm,震动频率120r/min,光照4500lx,光照时间13h/d,温度25℃,悬浮培养出来的愈伤组织放于液氮-196℃中保存。
2. 按照权利要求1所述的一种漏斗泡囊草悬浮细胞培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(1)中所述漏斗泡囊草无菌叶片的获得为,取漏斗泡囊草叶片,干净纱布清洗,在洗衣粉中浸泡2min,流水冲洗20min,超净工作台上0.2%氯化汞处理8min,流水冲洗5次,2mg/L泰乐菌素中浸泡10min。
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