[发明专利]一种白芷诱变育种的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及白芷组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。

背景技术

白芷，Angelica dahurica (Fisch. ex Hoffm.) Benth. et Hook. f. ex Franch. et Sav，伞形科，多年生高大草本，高1-2.5米，喜温和湿润的气候及阳光充足的环境，能耐寒。因主根粗大，入土较深，故宜栽种在土层深厚、疏松肥沃、排水良好的砂壤土或壤土。幼苗期要求土壤湿润，生长后期则略喜干燥，如后期过湿则发生烂根，冬季若土壤干旱而遇冻，幼苗容易冻死，但若土壤湿润，则幼苗可忍受-6至-8℃低温，在过于寒冷的高山地或荫蔽的地方，生长不良。以根入药，有祛病除湿、排脓生肌、活血止痛等功能，主治风寒感冒、头痛、鼻炎、牙痛、赤白带下、痛疖肿毒等症，亦可作香料。北方的一些省区有栽培，多自产自销，少数调省外，一般生于林下、林缘、溪旁、灌丛和山谷草地，目前白芷采用播种繁殖，组培研究尚未见报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是一种白芷诱变育种的快速繁殖方法，本发明结合组织培养技术对白芷进行多倍体诱导，可以快速有目的的获得白芷四倍体新品种，且茎秆粗壮，利用率高。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

取白芷的种子，在无菌条件下剥壳，用70%的乙醇消毒1.5min，再用1%的溴水溶液消毒20min，无菌水冲洗5次，放置于MS培养基中，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照培养，温度30℃，培养出的无菌苗，在无菌条件下，将长至子叶展平的无菌苗置于100-700mg/L的秋水仙素溶液中，在20℃黑暗条件下振荡培养36h，摇床转速100r/min，秋水仙素浸泡后的无菌苗的茎尖，接种到WPM+ZT0.1mg/L+6-BA0.5mg/L的培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期15h/d，温度24±1℃，将增殖后的丛生芽，切割成3株一丛，接种入1/3MS+IAA0.04mg/L中，附加蔗糖60g/L，琼脂4g/L，pH5.8，光照13000lx，光期17h/d，温度25±1℃。

本发明具有诱变生根率高的特点，生产出来白芷的根茎粗壮，利用率大，利于大规模种植。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取白芷的种子，在无菌条件下剥壳，用70%的乙醇消毒1.5min，再用1%的溴水溶液消毒20min，无菌水冲洗5次，放置于MS培养基中，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照培养，温度30℃，培养出的无菌苗，在无菌条件下，将长至子叶展平的无菌苗置于100mg/L的秋水仙素溶液中，在20℃黑暗条件下振荡培养36h，摇床转速100r/min，秋水仙素浸泡后的无菌苗的茎尖，接种到WPM+ZT0.1mg/L+6-BA0.5mg/L的培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期15h/d，温度24±1℃，将增殖后的丛生芽，切割成3株一丛，接种入1/3MS+IAA0.04mg/L中，附加蔗糖60g/L，琼脂4g/L，pH5.8，光照13000lx，光期17h/d，温度25±1℃，生根率94%。

实施例2

取白芷的种子，在无菌条件下剥壳，用70%的乙醇消毒1.5min，再用1%的溴水溶液消毒20min，无菌水冲洗5次，放置于MS培养基中，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照培养，温度30℃，培养出的无菌苗，在无菌条件下，将长至子叶展平的无菌苗置于300mg/L的秋水仙素溶液中，在20℃黑暗条件下振荡培养36h，摇床转速100r/min，秋水仙素浸泡后的无菌苗的茎尖，接种到WPM+ZT0.1mg/L+6-BA0.5mg/L的培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期15h/d，温度24±1℃，将增殖后的丛生芽，切割成3株一丛，接种入1/3MS+IAA0.04mg/L中，附加蔗糖60g/L，琼脂4g/L，pH5.8，光照13000lx，光期17h/d，温度25±1℃，生根率95%。

实施例3

取白芷的种子，在无菌条件下剥壳，用70%的乙醇消毒1.5min，再用1%的溴水溶液消毒20min，无菌水冲洗5次，放置于MS培养基中，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，光照培养，温度30℃，培养出的无菌苗，在无菌条件下，将长至子叶展平的无菌苗置于700mg/L的秋水仙素溶液中，在20℃黑暗条件下振荡培养36h，摇床转速100r/min，秋水仙素浸泡后的无菌苗的茎尖，接种到WPM+ZT0.1mg/L+6-BA0.5mg/L的培养基中进行丛生芽的增殖，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照3000lx，光期15h/d，温度24±1℃，将增殖后的丛生芽，切割成3株一丛，接种入1/3MS+IAA0.04mg/L中，附加蔗糖60g/L，琼脂4g/L，pH5.8，光照13000lx，光期17h/d，温度25±1℃，生根率96%。