[发明专利]一种锡生藤多倍体诱变的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410540492.3 | 申请日: | 2014-10-14 |
公开(公告)号: | CN104255511A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 刘东锋;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京帝道农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 锡生藤 多倍体 诱变 快速 繁殖 方法 | ||
1. 一种锡生藤多倍体诱变的快速繁殖方法,包括锡生藤无菌花粉的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导,其主要步骤如下:
(1)取锡生藤的花粉,用70%的乙醇消毒0.5min,再用1%的过氧化氢溶液消毒5min,无菌水冲洗5次;
(2)将步骤(1)消毒处理过的锡生藤花粉,接种到MS+NAA0.4mg/L+KT6mg/L+秋水仙素50-150mg/L的培养基中进行愈伤组织的诱导,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,pH5.8,暗光照,温度22±2℃;
(3)取步骤(2)诱导出来的分散稳定的愈伤组织接种到VR+TDZ2mg/L+NAA0.1mg/L+色氨酸24μmol/L的培养基中进行愈伤组织的分化,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,pH5.8,光照2500lx,光期12h/d,温度23±2℃;
(4)将步骤(3)分化出来的胚接入MS培养基中进行壮苗生长,附加蔗糖60g/L,琼脂7g/L,pH5.8,光照20000lx,光期14h/d,温度28℃。
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