[发明专利]一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法

说明书

 

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法。

背景技术

甜菊糖苷是从甜菊叶中提取分离得到的一种高甜度低热能、味质好、且安全无毒的天然低热糖源，其甜度为蔗糖的150～300倍，可以替代糖精或蔗糖，应用于各种食品、饮料中。甜菊糖苷还可以防止糖尿病、肥胖症及小儿龋齿等疾病，是患者的理想甜味剂。但甜菊糖的苦味一直影响它的推广和运用，日本和韩国采用转移酶和水解酶化的方法来改变甜菊糖的后苦味；不足的是带来的副作用往往是甜度倍数下降，成本增高。同样造成应用上的困难。但随着天然甜味剂市场需求的逐步增大，越来越多的企业开始关注研究和解决甜菊的后苦味，人们试图提炼精致高纯度的莱鲍迪苷A的甜菊产品，去掉口感不好的成分甜菊双甙和杜克甙，这样甜度可高达350-400倍，同时除掉了甜菊的后苦味。目前韩国、马来西亚、美国、中国等的一些企业都可以将莱鲍迪苷A提纯到80%以上，但由于各自工艺和方法的差异，普遍存在转化率低，成本高，有效成分控制不稳定等弊端。

发明内容

发明目的：本发明针对现有技术中工艺复杂、提取纯度低的不足，提出一种工艺简单、成本低以及纯度高的从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法。

技术方案：本发明所述的一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：

（1）准备提取溶剂准备阶段；

（2）混合阶段：将甜菊叶与上述提取溶剂按质体比1：10～20混合；

（3）升温提取阶段：将上述混合物加热升温至80～90℃，并保温1.5-2.0小时；

（4）过滤离心阶段：将提取混合物先通过目数为300目的布袋过滤器，再通过转速为4000转/分钟的碟片离心机，离心至澄清，冷却至40℃以下；

（5）大孔树脂吸附分离阶段：将冷却后的提取过滤澄清液上大孔吸附树脂吸附，水洗后再用50%-80%乙醇解吸；

（6）分子膜分离阶段：将上述解吸液用分子膜分离，HPLC跟踪分析，将含有莱鲍迪苷A纯度达85%以上的溶液合并收集；

（7）浓缩阶段：将收集液用刮板浓缩器减压浓缩至比重为1.1～1.5；

（8）放置阶段：将浓缩液在40℃以下的温度放置12-24小时，莱鲍迪苷A充分析出；

（9）固液分离阶段：用离心或板框压滤的方法进行固液分离，过滤滤材孔径大于400目；

（10）溶剂漂洗阶段：将分离的固体物用95%-100%的乙醇水溶液，按固体物质量的2-4倍进行漂洗15-30分钟；

（11）二次固液分离：用离心或板框压滤的方法进行再次固液分离，过滤滤材孔径大于400目；

（12）干燥：将分离的固形物用烘干或喷雾干燥的方法进行干燥。

作为优化，步骤（1）所述提取溶剂为乙醇与水的混合物。

进一步的优化，所述提取溶剂为乙醇与水按照溶剂的比例按1：10～100%混合。

作为优化，步骤（6）所述分子膜为组合膜，具体是1000-5000分子量卷式超滤膜、100-600分子量卷式纳滤膜，HPLC跟踪分析膜滤液中莱鲍迪苷A的纯度。

有益效果：通过本发明的提取方法能使提取的莱鲍迪苷A纯度达到97%以上，且该方法工艺路线简单，对设备要求不高，而且具有低能耗、高产出、莱鲍迪苷A纯度稳定、彻底去除后苦味等优点，适合工业化生产的优点。

附图说明

图1为实施例1中的莱鲍迪苷A 对照品溶液HPLC图谱及分析表；

图2为实施例1中的莱鲍迪苷A膜滤液HPLC图谱及分析表；

图3为实施例1中的莱鲍迪苷A 样品溶液HPLC图谱及分析表；

图4为实施例2中的莱鲍迪苷A 对照品溶液HPLC图谱及分析表；

图5为实施例2中的莱鲍迪苷A膜滤液HPLC图谱及分析表；

图6为实施例2中的莱鲍迪苷A 样品溶液HPLC图谱及分析表；

图7为实施例3中的莱鲍迪苷A 对照品溶液HPLC图谱及分析表；

图8为实施例3中的莱鲍迪苷A膜滤液HPLC图谱及分析表；

图9为实施例3中的莱鲍迪苷A 样品溶液HPLC图谱及分析表。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：

实施例1

一种从甜菊叶中提取分离莱鲍迪苷A的方法，包括如下步骤：

（1）提取溶剂准备阶段：乙醇与水的比例为20%；

（2）混合阶段：甜菊叶与乙醇混合溶剂按质体比1：15；