[发明专利]一种热带醋杆菌全细胞催化生产甘油酸的方法

权利要求书

1.一种热带醋杆菌全细胞催化生产甘油酸的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)一级摇瓶种子培养：将甘油酸生产菌热带醋杆菌(Acetobacter tropicalis)CHM061701接种于装有一级种子培养基的摇瓶中培养；所述热带醋杆菌(Acetobacter tropicalis)CHM061701已于2014年7月7日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该保藏中心登记入册编号为CGMCC NO.9417；

所述接种的接种量按质量百分比为一级种子培养基的0.1％～1％；所述一级种子培养基的组成为葡萄糖1～10g/L，酵母粉2～10g/L，蛋白胨2～10g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5～2g/L，灭菌前pH 6～7；

所述培养的条件于26～32℃，以150～250rpm培养16～28h；在步骤2)中，所述培养的条件于26～32℃，以150～250rpm培养16～28h；

2)二级摇瓶种子：将步骤1)的一级摇瓶种子培养的种子接种于装有二级种子培养基的摇瓶中培养；

所述种子接种的接种量按质量百分比为二级种子培养基的1％～10％；所述二级种子培养基的组成为葡萄糖1～10g/L，酵母粉2～10g/L，蛋白胨2～10g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5～2g/L，灭菌前pH 6～7；

3)菌体富集培养：将步骤2)的二级摇瓶种子培养的种子接种于装有菌体富集培养基的摇瓶中培养；

所述将步骤2)的二级摇瓶种子培养的种子接种于装有菌体富集培养基的摇瓶中培养的条件为26～32℃，以150～250rpm培养48～72h；

所述种子接种的接种量按质量百分比为菌体富集培养基的1％～10％；所述菌体富集培养基的组成为甘油10～100g/L，酵母粉0.5～2g/L，蛋白胨0.5～2g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5～2g/L，KH₂PO₃ 0.5～1.0g/L，K₂HPO₃ 0.08～0.15g/L，灭菌前pH 6～7；

4)菌体收集：取步骤3)培养所得菌液离心，洗涤，收集菌体，再加入甘油水溶液，调节初始pH为5～8；

所述菌液与甘油的质量比为(0.1～0.2)∶(2.25～4.5)，所述甘油水溶液的质量浓度为75～150g/L；

5)全细胞催化转化：将步骤4)所得的含有菌体的甘油水溶液于摇瓶中进行催化转化，得甘油酸。

2.如权利要求1所述一种热带醋杆菌全细胞催化生产甘油酸的方法，其特征在于在步骤4)中，所述离心的条件为8000～12000rpm离心5～10min；所述洗涤是洗涤2～3次。

3.如权利要求1所述一种热带醋杆菌全细胞催化生产甘油酸的方法，其特征在于在步骤5)中，所述催化转化的条件为在温度26～32℃下，以150～250rpm进行催化转化24～48h。