[发明专利]一种蛋白粉新鲜度的测定方法

说明书

技术领域

本发明属于含量测定技术领域，具体涉及一种蛋白粉新鲜度的测定方法。

背景技术

蛋白粉是采用提纯的大豆蛋白或乳清蛋白，通过加工制作成粉剂，为缺乏蛋白质的人群补充蛋白质，具有提高机体免疫力和缓解体力疲劳的保健功能，被广泛应用到保健食品和食品添加剂中。蛋白粉分为乳清蛋白粉和大豆蛋白粉，其中的蛋白质含量在2.6g/100kJ～8.5g/100kJ的范围内，平均在4.4g/100kJ～5.4g/100kJ，蛋白粉在烘干、压榨、制粉的加工过程，以及包装、贮藏的过程中，由于条件不恰当，将会降低其营养价值及品位，直接影响到其经济价值。因此，探求和确立能如实反应蛋白粉新鲜度品质的指标，有效监控蛋白粉质量，需要不断改进、完善蛋白粉品质标准的检测方法和手段。

糠氨酸(furosine)是美拉德反应产物Amadori化合物的水解产物，糠氨酸是美拉德反应前期评价营养损失程度的一个重要指标，被广泛应用于评价奶制品、焙烤食品、蜂蜜、鸡蛋等在热处理和贮存过程中的营养损失的程度。由于蛋白粉中的蛋白质及碳水化合物含量丰富，在一定条件下会发生美拉德反应。

现有的糠氨酸检测方法有离子交换色谱法、表面荧光方法、HPLC梯度洗脱、反相离子对色谱法等，这些测定方法常用于对奶制品中的糠氨酸的测试，由于奶制品具有成分单一、纯净、易溶解的特点，以上测试方法的准确度高。但蛋白粉则不同，主要是其成分较为复杂，不够纯净，有些蛋白粉中还添加其他补充人体需要的物质，成为是一种集多种有机物和无机物的混合物，同时蛋白粉的粘性大，蛋白质含量高，若单纯采用上述检测方法，测定的干扰大，导致对蛋白质中的糠氨酸无法进行准确分析，其精密度、准确度和检出限等误差较大。

发明内容

本发明的目的是提供一种蛋白粉新鲜度的测定方法，该方法采用化学法前期处理和反相离子对色谱法的创新结合，用以测定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法来确定蛋白粉的产品质量和新鲜度具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。

一种蛋白粉新鲜度的测定方法，包括以下步骤：

步骤1，糠氨酸标准品溶液制备；

步骤2，样品前处理：将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液；

步骤3，将步骤1所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作为蛋白粉新鲜度的评价指标。。

作为上述发明的进一步改进，步骤1中用0.1mol/L的盐酸溶液作溶剂配制糠氨酸标准品溶液。

作为上述发明的进一步改进，步骤2中蛋白粉样品的加入量为0.35g，混合溶液的用量为6mL。

作为上述发明的进一步改进，所述混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1。

作为上述发明的进一步改进，所述混合溶液中盐酸溶液的浓度为10.2mol/L，草酸溶液的浓度为0.5mol/L。

作为上述发明的进一步改进，步骤2中溶液的加热方法为在110℃烘箱内放置24小时。

作为上述发明的进一步改进，步骤3中高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。

本发明与现有技术相比，其显著优点在于：第一，选用盐酸溶液、草酸溶液和超纯水的混合溶液对蛋白粉样品进行前处理，可去除蛋白粉中的杂质干扰，并使蛋白粉中的糠氨酸得到充分溶解；第二，用反相离子对色谱法测定蛋白粉中糠氨酸的含量，方法具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。

具体实施方式

实施例1

精密度实验

步骤1，糠氨酸标准品溶液制备：称取糠氨酸标准样品2.5mg，用0.1mol/L的盐酸溶解于25mL容量瓶中，其浓度为100mg/L，作为标准贮备液，放置于-20℃冰箱中保存。分别吸取2.0、4.0、6.0、8.0ml糠氨酸标准贮备液于10ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸稀释至刻度摇匀。