[发明专利]一种姬松茸菌种液氮保藏方法有效
| 申请号： | 201410558623.0 | 申请日： | 2014-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN104312920B | 公开（公告）日： | 2017-07-07 |
| 发明（设计）人： | 刘新锐;谢宝贵;邓优锦;江玉姬;朱坚 | 申请（专利权）人： | 福建农林大学 |
| 主分类号： | C12N1/04 | 分类号： | C12N1/04;C12R1/645 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 350002 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 姬松茸 菌种 液氮 保藏 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种姬松茸菌种液氮保藏方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）将姬松茸接种于M3培养基，正面放置于27～30℃恒温生化培养箱，培养8～10d；
（2）在无菌操作环境下，取新鲜菌块于灭菌的安培管，注入灭菌过的10~12wt%甘油，没过菌块，常温静置2.5～3.0h；
（3）把安培管放入程序降温仪，采用如下降温程序：在常温下以4℃/min降至4℃，再以1℃/min降到-40℃，后放入液氮罐中保存；
（4）启用液氮罐中保存的菌种时，将安培管迅速从液氮罐中取出，放入30℃恒温水浴锅，解冻5min，接种于M3培养基；
所述M3培养基：马铃薯150～180g/L，玉米粉75～100g/L，蔗糖18～20g/L，蛋白胨2.0～3.0g/L，KH2PO4 1.8～2.0g/L，MgSO4 0.8～1.0g/L，VB1 10mg/L，琼脂条23～25g/L，pH值自然；
M3培养基的配制：将马铃薯去皮切成小块，加1L的蒸馏水，煮沸浸提，过滤，取滤液，接着加入玉米粉，煮沸浸提，过滤，取滤液，再加入琼脂条溶解，最后加入蔗糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO4、VB1溶解，用蒸馏水补足至1L。
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