[发明专利]一种用基因工程大肠杆菌生产长链脂肪酸的方法

权利要求书

1.一种生物催化葡萄糖合成长链脂肪酸的方法，其特征在于在含有葡萄糖的发酵培养基中对能够表达硫酯酶基因AtFatA的重组工程大肠杆菌进行发酵，重组工程大肠杆菌转化葡萄糖合成长链脂肪酸。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的重组工程大肠杆菌是将含有硫酯酶基因AtFatA的重组表达载体转染大肠杆菌所得；所述的大肠杆菌优选大肠杆菌BL21(DE3)。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的重组表达载体以pACYCDuet-1载体为出发载体，NcoI/SalI切位点间插入硫酯酶基因AtFatA所得。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述的基因AtFatA选自Genbank登录号为：AK176105的序列，或和AtFatA基因同源性超过70％的核酸序列，或来源于其它生物体，和AtFatA基因没有明显的同源性，但和AtFatA具有相同或相似功能的核酸序列。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的含有葡萄糖的发酵培养基配方为6g/LNa2HPO4，3g/L KH2PO4，1g/L NH4Cl，0.5g/L NaCl，1mM MgSO4，2％葡萄糖；所述的发酵培养条件为：培养温度30-37℃、搅拌速度400-800rpm、pH 6.5-7.5和溶氧20％以上的条件下培养至OD₆₀₀约为12-20，加入诱导剂IPTG至终浓度0.1-1.0mmol/L，两小时后收集产物。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的方法还包含从发酵产物中分离纯化长链脂肪酸。

7.根据权利要求1～6中任一项所述方法合成的长链脂肪酸。

8.一种用于生物发酵制备不饱和脂肪酸的重组大肠杆菌，其特征在于所述的重组工程大肠杆菌是将含有硫酯酶基因AtFatA的重组表达载体转染大肠杆菌所得；所述的大肠杆菌优选大肠杆菌BL21(DE3)。

9.根据权利要求8所述的重组大肠杆菌，其特征在于所述的重组表达载体以pACYCDuet-1载体为出发载体，NcoI/SalI酶切位点间插入硫酯酶基因AtFatA所得。

10.权利要求8或9所述的重组大肠杆菌在制备长链脂肪酸中的应用。