[发明专利]盐藻的收集与保种方法在审
| 申请号： | 201410563145.2 | 申请日： | 2014-10-22 |
| 公开（公告）号： | CN104312923A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 王培磊 | 申请（专利权）人： | 临沂大学 |
| 主分类号： | C12N1/12 | 分类号： | C12N1/12;C12N1/04;C12R1/89 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 276000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 收集 保种 方法 | ||
1.一种盐藻的收集与保种方法，其特征在于步骤如下：
将培养完毕的盐藻液，按1升藻液加入100毫克甲壳素和50毫克聚丙烯酰胺的量加入甲壳素和聚丙烯酰胺，搅拌30分钟，再按1升藻液加入80毫克小苏打(即碳酸氢钠)的量加入小苏打，再搅拌30分钟，后将藻液置于黑暗中静置、沉淀24小时，可见底部有牙膏状沉淀物，即为目的产物藻泥，弃去上清液可得；因上清液中还有少量盐藻细胞，将上清液搅拌20分钟，再沉淀24小时，再取牙膏状沉淀物即可；
盐藻保种用的培养液，配方如下：
硝酸铵4毫克，磷酸二氢钠7毫克，脯氨酸2毫克，丙酮酸盐5毫克，柠檬酸钾2毫克，甘氨酸甜菜碱12毫克，谷氨酸钠4毫克，乙酸钠4毫克，甘露醇6毫克，葡萄糖9毫克，人尿1.5毫升，甘油3毫克，二甲亚砜0.5毫克，链霉素0.1毫克，煮沸冷却后的海水1000毫升；
用一个150毫升的三角烧瓶，装入上述培养液100毫升，取生长旺盛、无污染的盐藻接种至密度达到每毫升40万个细胞，塑料薄膜封口，在光照培养箱中培养72小时，温度24℃，光照强度4500lux，然后用报纸包裹三角烧瓶，转入4℃冰箱，放置12小时，再转入0℃冰箱，放置12小时，转入-10℃冰箱，放置12小时，最后转入-16℃冰箱，长期黑暗放置保种，最多可保种24个月，后取出解冻，按-16℃、-10℃、0℃、4℃、24℃依次放置12小时的顺序依次逐渐解冻和升温，后加入50毫升新鲜培养液，细胞可在48小时后恢复活力，依靠鞭毛自由游动。
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