[发明专利]β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原及宽谱特异性抗体及其制备

权利要求书

1.一种β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原，其特征在于，所述的多簇抗原是两种以上β-肾上腺素受体激动剂与载体蛋白的偶联物，所述的载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白，所述的β-肾上腺素受体激动剂选自克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺。

2.根据权利要求1所述的β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原，其特征在于：系克伦特罗-沙丁胺醇-牛血清白蛋白或克伦特罗-沙丁胺醇-卵清蛋白偶联物，以克伦特罗和沙丁胺醇为半抗原，以牛血清白蛋白或卵清蛋白为载体，按以下步骤制备得到：

1)在牛血清白蛋白或卵清蛋白上以重氮法偶联克伦特罗半抗原，再进行纯化：

将0.2mmol盐酸克伦特罗于溶于1～5ml稀盐酸中，加入0.2～2mol/L的亚硝酸钠溶液至淀粉碘化钾试纸变为紫色，继续反应1～3h后将反应液加入到5～10ml含有5～10mg/ml载体蛋白的碳酸钠缓冲溶液中，再继续反应3～5h；将上述反应液用磷酸缓冲溶液透析3～6次，冷冻干燥即可得到克伦特罗-载体蛋白偶联物冻干粉；

2)在步骤1)的产物上以混合酸酐法偶联沙丁胺醇半抗原，再进行纯化：

将0.2mmol硫酸沙丁胺醇溶于5～10ml无水乙醇中，加入0.2mmol戊二酸酐，室温下反应3～5h，离心，将下层固体溶于5～10ml N，N-二甲基甲酰胺，加入0.2mmol三正丁胺和0.2mmol氯甲酸异丁酯，继续反应1～3h；将上述反应液加入到5～10ml含有5～10mg/ml克伦特罗-载体蛋白偶联物的磷酸缓冲溶液中，室温反应过夜；将上述反应液用磷酸缓冲溶液透析3～6次，冷冻干燥即可得到克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物冻干粉。

3.根据权利要求1所述的β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原，其特征在于：系克伦特罗-莱克多巴胺-牛血清白蛋白或克伦特罗-莱克多巴胺-卵清蛋白偶联物，以克伦特罗和莱克多巴胺为半抗原，以牛血清白蛋白或卵清蛋白为载体，按以下步骤制备得到：

1)在牛血清白蛋白或卵清蛋白上以混合酸酐法偶联莱克多巴胺半抗原，再进行纯化：

将0.2mmol戊二酸酐溶于5ml吡啶中，加入0.2mmol盐酸莱克多巴胺，室温反应10～20h，蒸干溶剂，将所得油状物溶于5～10ml N，N-二甲基甲酰胺，加入0.2mmol三正丁胺和0.2mmol氯甲酸异丁酯，继续反应1～3h；将上述反应液加入到5～10ml含有5～10mg/ml载体蛋白的磷酸缓冲溶液中，室温反应过夜；将上述反应液用磷酸缓冲溶液透析3～6次，冷冻干燥即可得到莱克多巴胺-载体蛋白偶联物冻干粉；

2)在步骤1)的产物上以重氮法偶联克伦特罗半抗原，再进行纯化：

将0.2mmol盐酸克伦特罗于溶于1～5ml稀盐酸中，加入0.2～2mol/L的亚硝酸钠溶液至淀粉碘化钾试纸变为紫色，继续反应1～3h后将反应液加入到5～10ml含有5～10mg/ml莱克多巴胺-载体蛋白偶联物的碳酸钠缓冲溶液中，再继续反应3～5h；将上述反应液用磷酸缓冲溶液透析3～6次，冷冻干燥即可得克伦特罗-莱克多巴胺-载体蛋白偶联物冻干粉。