[发明专利]一种基于代谢参数还原糖补糖生产多拉菌素的方法有效
申请号: | 201410564486.1 | 申请日: | 2014-10-22 |
公开(公告)号: | CN105586374B | 公开(公告)日: | 2019-06-18 |
发明(设计)人: | 童永亮;别一;刘会明;刘省伟;郭明;袁建栋 | 申请(专利权)人: | 重庆乾泰生物医药有限公司 |
主分类号: | C12P17/18 | 分类号: | C12P17/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 400700 重庆市北碚区城*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 代谢 参数 还原 糖补糖 生产 多拉 菌素 工艺 | ||
1.一种基于代谢参数还原糖补糖生产多拉菌素的方法,包括以下工艺步骤:
(1)、将经斜面培养基培养和种子培养基培养所得的种子液接种至装有发酵培养基的发酵罐中;
(2)、发酵过程实时监测发酵培养基中还原糖浓度,选择初级代谢结束后,总糖浓度下降至1.5~2%wt,同时还原糖浓度降低至0.3wt%~1.0wt%时,开始流加补糖;
(3)发酵后期单位增长缓慢,出现菌丝自溶,产品开始从胞内向胞外释放时,放罐;
其中,步骤(1)发酵罐的发酵培养基中初始玉米淀粉含量为8wt%,通过控制玉米淀粉液化程度,使初始发酵还原糖浓度维持在1.8-2wt%之间;
步骤(2)所述流加补糖的操作,是根据每天消耗0.5%的总糖标准以及每天体积挥发量,流加浓度为20%-60%液化玉米淀粉或麦芽糊精。
2.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(1)所述斜面培养基的培养条件为:将菌株接种到斜面培养基上,25℃~30℃条件下,培养6~8天,得到孢子;斜面培养基含有(wt%):甘露醇1-3,黄豆饼粉1-3,琼脂1-3,余量为蒸馏水,并将斜面培养基的pH值调节为7.0-7.2。
3.根据权利要求1所述方法,其特征在于,步骤(1)所述种子培养基的培养条件为:将经斜面培养所得的孢子接入种子培养基,于25℃~30℃,摇床转速为220~250r/min,培养40h~50h;种子培养基含有(wt%):玉米淀粉1-3,葡萄糖0.3-0.7,黄豆饼粉1-2,棉籽饼粉1-2,余量为自来水,并将种子培养基的pH值调节为7.0-7.2。
4.根据权利要求1~3任一项权利要求所述方法,其特征在于,步骤(1)将种子液接入发酵罐的接种量为8-12%(V);发酵培养条件为:培养温度在27-29℃,压力0.04-0.06MPa,DO控制在30%-100%,转速200-600rpm的条件下,培养432-480h。
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