[发明专利]一种β-肾上腺素受体激动剂多残留检测试剂盒及试纸

权利要求书

1.一种β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原，其特征在于：所述的多簇抗原是以克伦特罗和沙丁胺醇为半抗原，与载体蛋白偶联得到的克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物；所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白。

2.根据权利要求1所述的β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原，其特征在于：所述的多簇抗原以克伦特罗和沙丁胺醇为半抗原，牛血清白蛋白或卵清蛋白为载体蛋白，按以下步骤制备得到：

1)在载体蛋白上以重氮法偶联克伦特罗半抗原，再进行纯化：

将0.2mmol盐酸克伦特罗于溶于1～5ml稀盐酸中，加入0.2～2mol/L的亚硝酸钠溶液至淀粉碘化钾试纸变为紫色，继续反应1～3h后将反应液加入到5～10ml含有5～10mg/ml的载体蛋白的碳酸钠缓冲溶液中，再继续反应3～5h；将上述反应液用磷酸缓冲溶液透析3～6次，冷冻干燥，即可得到克伦特罗-载体蛋白偶联物冻干粉；

2)在步骤1)的产物上以混合酸酐法偶联沙丁胺醇半抗原，再进行纯化：

将0.2mmol硫酸沙丁胺醇溶于5～10ml无水乙醇中，加入0.2mmol戊二酸酐，室温下反应3～5h，离心，将下层固体溶于5～10ml N，N-二甲基甲酰胺，加入0.2mmol三正丁胺和0.2mmol氯甲酸异丁酯，继续反应1～3h；将上述反应液加入到5～10ml含有5～10mg/ml克伦特罗-载体蛋白偶联物的磷酸缓冲溶液中，室温反应过夜；将上述反应液用磷酸缓冲溶液透析3～6次，冷冻干燥，制得所述的β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原。

3.一种β-肾上腺素受体激动剂宽谱特异性抗体，其特征在于，所述宽谱特异性抗体由所述的β-肾上腺素受体激动剂多簇抗原通过动物免疫获得。

4.根据权利要求3所述的β-肾上腺素受体激动剂宽谱特异性抗体，其特征在于，所述宽谱特异性抗体是由克伦特罗-沙丁胺醇-牛血清白蛋白通过动物免疫获得的多克隆抗体CL-SAL-BSAAb。

5.一种用于β-肾上腺素受体激动剂多残留检测的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述的酶联免疫试剂盒包含下述1)、2)、3)或4)中任一所述的试剂：

1)酶联免疫试剂盒中包括克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物、宽谱特异性多克隆抗体CL-SAL-BSAAb和酶标记羊抗兔IgG；其中，所述偶联物作为包被原；

2)酶联免疫试剂盒中包括克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物、宽谱特异性多克隆抗体CL-SAL-BSAAb的酶标记物；其中，所述偶联物作为包被原；

3)酶联免疫试剂盒中包括克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物的酶标记物、宽谱特异性多克隆抗体CL-SAL-BSAAb和羊抗兔IgG；其中，所述羊抗兔IgG作为包被原；

4)酶联免疫试剂盒中包括克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物的酶标记物、宽谱特异性多克隆抗体CL-SAL-BSAAb；其中，所述宽谱特异性多克隆抗体CL-SAL-BSAAb作为包被原。

6.根据权利要求5所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于，所述酶联免疫试剂盒还包括β-肾上腺素受体激动剂标准品溶液、显色液、终止液、洗涤液、稀释液和提取液，所述β-肾上腺素受体激动剂为克伦特罗或沙丁胺醇。

7.一种用于β-肾上腺素受体激动剂多残留检测的免疫胶体金试纸，由PVC底板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成，其特征在于，所述的金标垫包被有胶体金标记的第二种属动物蛋白与宽谱特异性多克隆抗体CL-SAL-BSAAb的混合物，或第二种属动物蛋白与克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物的混合物；硝酸纤维素膜上包被有克伦特罗-沙丁胺醇-载体蛋白偶联物或CL-SAL-BSAAb构成的检测线和包被抗第二种属动物蛋白IgG构成的质控线；所述第二种属动物为与免疫动物不同的动物。

8.根据权利要求7所述的免疫胶体金试纸，其特征在于，所述β-肾上腺素受体激动剂为克伦特罗或沙丁胺醇。